【摘 要】
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为用原核系统表达鹅星状病毒（GAstV）的纤突蛋白，并以该蛋白作为包被抗原，建立鹅星状病毒血清抗体的间接ELISA检测方法。首先将构建成功的鹅星状病毒纤突蛋白基因导入原核表达载体pCold-TF中，利用大肠杆菌BL21菌株进行重组蛋白的表达。表达、纯化后的抗原包被ELISA酶标板，4℃过夜包被，包被抗原浓度1μg/mL，经1%BSA 37℃封闭2 h，待检血清倍比稀释后37℃孵育1 h,HRP-兔
【机 构】
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东北林业大学野生动物与自然保护地学院
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为用原核系统表达鹅星状病毒（GAstV）的纤突蛋白，并以该蛋白作为包被抗原，建立鹅星状病毒血清抗体的间接ELISA检测方法。首先将构建成功的鹅星状病毒纤突蛋白基因导入原核表达载体pCold-TF中，利用大肠杆菌BL21菌株进行重组蛋白的表达。表达、纯化后的抗原包被ELISA酶标板，4℃过夜包被，包被抗原浓度1μg/mL，经1%BSA 37℃封闭2 h，待检血清倍比稀释后37℃孵育1 h,HRP-兔抗鹅酶标抗体倍比稀释，37℃孵育1 h，避光显色20 min加终止液后酶标仪读板，经进一步条件优化，建立检测血清学鹅星状病毒抗体的间接ELISA方法。结果表明：建立的间接ELISA检测方法具有良好的特异性、灵敏性、重复性，可为开展鹅星状病毒血清流行病学调查和鉴定提供方法。
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