【摘 要】
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目的研究过氧化氢（H2O2）引起的氧化应激损伤对小鼠肾小管上皮细胞（TCMK-1）Klotho蛋白表达的影响及可能的作用机制。方法体外培养TCMK-1细胞，以不同浓度的H2O2刺激细胞，采用流式细胞术检测活性氧族（ROS）生成；CCK-8检测细胞生存率；流式细胞术和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡；Western印迹法检测Klotho蛋白、细胞凋亡相关蛋白和抗氧化酶的表达。结果与正常对照
【机 构】
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200127 上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科,200127 上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科,上海市免疫学研究所,200127 上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科,200127 上海交通大
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目的研究过氧化氢（H2O2）引起的氧化应激损伤对小鼠肾小管上皮细胞（TCMK-1）Klotho蛋白表达的影响及可能的作用机制。
方法体外培养TCMK-1细胞，以不同浓度的H2O2刺激细胞，采用流式细胞术检测活性氧族（ROS）生成；CCK-8检测细胞生存率；流式细胞术和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡；Western印迹法检测Klotho蛋白、细胞凋亡相关蛋白和抗氧化酶的表达。
结果与正常对照组比较，H2O2刺激后TCMK-1细胞内ROS水平升高（均P<0.05），抗氧化酶锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase，SOD2）和过氧化氢酶（catalase，CAT）表达水平降低（均P<0.05）；Klotho蛋白的表达水平降低（均P<0.05）； TCMK-1细胞生存率显著降低（均P<0.05），且呈剂量依赖（0.3~0.9 mmol/L H2O2）；TCMK-1凋亡细胞比例呈剂量依赖性增加（均P <0.05）；Bax/Bcl-2表达比升高，JNK、p38蛋白磷酸化水平均升高（均P<0.05）。
结论H2O2刺激TCMK-1细胞诱导氧化应激损伤，抑制Klotho蛋白的表达，而Klotho表达下降伴随着细胞凋亡的增加和p38、JNK通路的活化。
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