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目的 探讨理阿诺碱(ryanodine)对雷帕霉素(rapamycin)诱导的内皮生长晕细胞(endothelial outgrowth cell,EOC)功能及其相关总内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达及eNOS( Thr495)的磷酸化水平。方法 密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,培养并扩增EOC,免疫组化法、荧光染色法鉴定其内皮细胞特性。实验分为对照组、10 nmol/L rapamycin组(rapamycin组)、10μmol/L ryanodine预处理1h再加10 nmol/L的rapamycin组(ryanodine+ rapamycin组)、10 μmol/Lryanodine组(ryanodine组),各处理组与EOC作用24h,CCK8检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力。用特异性的总eNOS抗体及磷酸化的eNOS( Thr495)[p-eNOS(Thr495)]抗体的蛋白免疫印迹法( Western blot)检测总eNOS蛋白表达及eNOS( Thr495)磷酸化水平。结果 rapamycin组EOC的增殖及迁移均低于对照组(P均<0.05),eNOS( Thr495)磷酸化水平高于对照组(P<0.05),总eNOS蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义。Ryanodine+ rapamycin组EOC的增殖及迁移均高于rapamycin组(P均<0.05),eNOS( Thr495)磷酸化水平低于rapamycin组(P<0.05),总eNOS蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义。Ryanodine组EOC的增殖、迁移及总eNOS及eNOS( Thr495)磷酸化水平与对照组比较差异均无统计学意义。结论 rapamycin可抑制EOC的增殖及迁移,增强eNOS(Thr495)磷酸化水平。Ryanodine可以改善rapamycin诱导的EOC增殖及迁移能力的抑制,降低eNOS(Thr495)磷酸化水平。