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摘 要：随着社会的迅速发展，人们对日用品的要求也在逐渐提高。该实验以甘草为主要原料进行研究，通过皂化反应的方法进行制备，并采用抑菌实验中的琼脂平板法，观察菌落的生长状况定性的分析香皂的抑菌效果。从而制得硬度适宜﹑光滑﹑抑菌程度好的甘草香皂，为广大伊斯兰教人群提供清真﹑抑菌效果好的甘草香皂。
关键词：甘草 清真 皂化反应 抑菌实验
中图分类号：TQ648.63 文献标识码：A 文章编号：1007-3973（2013）011-024-03
香皂是人们所熟悉的一种最为普通和广泛使用的洗涤用品之一，随着社会的发展、人们生活水平的提高和对皮肤保健意识的增强，人们对香皂的要求也在逐年升高，现在香皂不再是年轻妇女的专用品，上至老人下及婴儿无不存在其消费者。甘草既是一种好的药用性植物，又是一种好的美白、防晒、抑菌等的原料，其有效成分有抗氧、抗过敏、抗炎、抗皮肤肿瘤和有效祛除皮肤色斑的作用，还具有防止皮肤老化、有效清除超氧离子和抑制酪氨酸酶的活性等作用，在化妆品中，可配制成护肤霜、祛斑霜、高级珍珠霜等，起到防晒、增白、消炎和治疗皮肤病等作用，随着对甘草化学成分的深入研究， 人们发现甘草提取物， 特别是甘草中的黄酮对人体的皮肤有较好的美白和防护作用， 且安全、温和、能有效清除氧自由基，因而， 甘草在化妆品中的应用越来越受到重视。因此，把甘草提取物应用于化妆品中，符合集美白、防晒于一体的新趋势，相信不久的将来会有更多含甘草提取物或甘草仿生合成物的化妆品投放市场，以防护、美白人们的肌肤。并且据文献报道，甘草对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均有明显的抑菌作用。所以我们大胆的设想并通过进一步的探究，将甘草的水提液应用与香皂的制备中。由于市售香皂大部分含有非清真类油脂，不符合伊斯兰教宗教信仰，故为满足伊斯兰群众的信仰理念，为让其能使用到清真香皂，本实验采用牛油、椰子油、棕榈油和橄榄油及抑菌程度好的甘草进行研究，从而制备出一种新型甘草香皂。
1 实验材料
1.1 器材
烧瓶、玻璃棒、温度计、小刀、铁器杯子、98-1-B型电子调温电热套、铁架台、香皂磨具、滴管、搅拌器、试管、勺子、电热板、铁盘、橡皮手套、滤纸、电子称、电磁炉、冰箱。
1.2 抑菌设备
洁净工作台（SW-CJ-2FD），苏州安泰空气技术有限公司，洁净度：100级；数控超声波清洗器（KQ-500DA），昆山市超声仪器有限公司；电热鼓风干燥箱（DHG-9075A），上海一恒科学仪器有限公司；立式压力蒸汽灭菌器（LDZX-50KBS），上海申安医疗器械厂；恒温摇床（HS-200B），上海和呈医疗器械有限公司。
1.3 药材
乌拉尔甘草切片（购于银川市兴庆区古方大药房）。
1.4 原料及试剂
牛油（购于蔬菜市场）；椰子油﹑棕榈油﹑橄榄油（DIY手工皂原料基础油，产于江苏苏州）；氢氧化钠（天津市化学试剂三厂，批号：860314）；十二烷基苯磺酸钠（K12，上海白猫股份有限公司，工业级）；蒸馏水（宁夏医科大学药化实验室）；柠檬酸、二氧化钛、氯化钠、丁羟甲苯（天津市东华化学试剂厂，分析纯）；香精（广州百花香精香料有限公司，食品级）。
1.5 实验菌株
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌（宁夏医科大学检验学院实验中心）。
1.6 培养基
MH（配量27g/1000ml，杭州天河微生物试剂有限公司，生产批号：080731）；MH琼脂培养基（配量54g/1000ml，杭州天河微生物试剂有限公司，生产批号：080810）；营养琼脂（货号：02-276，北京奥博星生物技术有限公司）；营养肉汤（货号：02-013，北京奥博星生物技术有限公司）。
2 实验方法
2.1 处方工艺研究
2.1.1 甘草药液的提取
取甘草切片50g，放入1000ml的平底烧瓶中，量取880ml的蒸馏水，并置于电热套中加热，将温度先调至100℃沸腾之后，再调至50℃进行煎煮，煎煮1h，趁热抽虑，收集药液，药渣重复上述操作煎煮两次，混合三次药液，即为甘草提取液。
2.1.2 甘草香皂油脂的比例及配方
在处方研究过程中，油脂比例直接影响香皂的软硬程度，故是香皂成型的关键所在。各油脂的皂化值及硬度见表1，各油脂的重量及百分比见表2，甘草香皂的配方见表3。
其中：加入NaOH的量=油脂€自砘？
水量=（油脂总质量€？8）/72
2.1.3 甘草香皂的制备工艺
皂化：将牛油、椰子油、棕榈油以及橄榄油按比例混合并加热，充分混匀并保持温度在45℃左右。配制30%氢氧化钠溶液，用玻璃棒搅拌控制温度在45℃左右，缓慢加入油液中，不断搅拌数分钟，直至皂液成粘稠的糊状。
加入添加剂：将二氧化钛溶于甘草水提液中，待完全溶解后加入至粘稠状皂液中，边加边搅拌，待搅拌均匀后继续加入十二烷基苯磺酸钠、柠檬酸、氯化钠等添加剂，充分搅拌，最后加入丁羟甲苯及适量香精。
成型：充分搅拌后将皂基注入模具中冷却，原封不动的在温暖的地方放置1-2天。待凝固后从模具中取出，放在通风处，避开日光直晒，即成型。
2.2 抑菌效果评价
2.2.1 培养基的配制
营养琼脂：取琼脂3.2g于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min，分装至培养皿中，制得琼脂平板备用。
MH肉汤（单料）：取本品2.7g于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min，备用。
MH肉汤（双料）：取本品5.4g于入100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min，备用。 营养肉汤（NB）：取本品1.8g于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解， 121℃高压灭菌15 min备用。
生理盐水：取0.9gNacl于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min备用。
2.2.2 受试菌液制备
将受试菌株接种于上述制备所得的培养基中，37℃，60rpm培养18-24h，无菌生理盐水校正浓度至107-108CFU/ml（菌落形成单位），即为供试菌的菌悬液。
取各个菌落分装在3ml的MH肉汤（双料）中，放置于摇床，37℃，60rpm培养6h，即为受试菌菌液。
取各受试菌菌液30？l接种于30ml营养肉汤中，放置于摇床，37℃，50rpm，培养6h。
2.2.3 供试品溶液配制
取上述制备所得的香皂成品1g，溶于5mlMH肉汤（双料）中，振摇混匀备用。
2.2.4 操作流程
于1-4号试管中均加入供试液1ml，MH单料1ml，并分别加入100ul的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌。于5-8号试管中均加入2mlMH肉汤（单料），并分别加入100ul的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌。于9号试管中加入2mlMH肉汤（单料）。
将1-9号试管均放置于摇床，37℃，60rpm中，培养16～18h。于无菌操作台上将各试管中的培养液接种于培养基，置37℃恒温摇床中培养16～18h，观察菌落的生长状况。平行做3次，以2次或3次相同结果为准。
3 结果与讨论
3.1 处方工艺研究
经处方工艺研究，最终制得硬度适宜、光滑美观﹑香味怡人、起泡效果良好的甘草香皂。在处方的筛选过程中，（1）为使产品适用于伊斯兰教人群，特选用清真的油脂制备香皂；（2）要制备硬度适宜的香皂，油脂的比例是制皂过程的关键所在；（3）为使所制得的香皂光滑美观、香味怡人、性质稳定，查阅文献[6]、[7]并经过多次实验，最终确定添加剂的选择和用量。
3.2 抑菌效果评价
以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌作为受试菌株进行体外抑菌实验，观察菌落的生长状况，见表4。
由表4可以看出，供试组加入上述甘草香皂，大肠杆菌所在的培养基中有极少量的菌落生长，金黄色葡萄球菌所在的培养基中无菌落生长，白色念球菌所在的培养基中无菌落生长，绿脓杆菌所在的培养基中无菌落生长。
对照组未加入甘草香皂，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌所在的各个培养基中均有菌落生长。
空白组中未加入甘草香皂及受试菌株，各个培养基种均无任何现象。
4 结论
本实验采用甘草提取液制备所得的香皂不仅光滑美观，起泡效果好，而且对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌四种受试菌株均有良好的抑菌作用。本香皂处方及制备工艺均遵循伊斯兰教信仰理念，适用于伊斯兰教人群。在提高少数民族生活质量，促进民族地区发展方面具有一定意义。
参考文献：
[1] 邹振海.试论透明香皂的制备方法和理念[J].科技资讯，2012（26）：210.
[2] 郭莹.前景堪忧的香皂市场[J].上海综合经济，1997（4）：41.
[3] 张连学，张黎明，王娟，等.甘草在化妆品中的应用[J].香精香料化妆品，2010，8（4）：45.
[4] 王建国，周忠，刘海峰，等.甘草的活性成分及其在化妆品中国的应用[J].日用化学用品，2004，34（4）：249.
[5] 丁长玲，邱世翠，宫照龙，等.甘草的体外抑菌作用研究[J].时珍国医国药，2002，13（9）：518.
[6] 步健飞.肥皂的油脂配方问题[J].日用化学工业，1982（4）：5-6.
[7] 杨卫国.复合皂基型液体香皂技术要点和配方设计[J].江苏氯碱，2009，12（6）：16-18.
关键词：甘草 清真 皂化反应 抑菌实验
中图分类号：TQ648.63 文献标识码：A 文章编号：1007-3973（2013）011-024-03
香皂是人们所熟悉的一种最为普通和广泛使用的洗涤用品之一，随着社会的发展、人们生活水平的提高和对皮肤保健意识的增强，人们对香皂的要求也在逐年升高，现在香皂不再是年轻妇女的专用品，上至老人下及婴儿无不存在其消费者。甘草既是一种好的药用性植物，又是一种好的美白、防晒、抑菌等的原料，其有效成分有抗氧、抗过敏、抗炎、抗皮肤肿瘤和有效祛除皮肤色斑的作用，还具有防止皮肤老化、有效清除超氧离子和抑制酪氨酸酶的活性等作用，在化妆品中，可配制成护肤霜、祛斑霜、高级珍珠霜等，起到防晒、增白、消炎和治疗皮肤病等作用，随着对甘草化学成分的深入研究， 人们发现甘草提取物， 特别是甘草中的黄酮对人体的皮肤有较好的美白和防护作用， 且安全、温和、能有效清除氧自由基，因而， 甘草在化妆品中的应用越来越受到重视。因此，把甘草提取物应用于化妆品中，符合集美白、防晒于一体的新趋势，相信不久的将来会有更多含甘草提取物或甘草仿生合成物的化妆品投放市场，以防护、美白人们的肌肤。并且据文献报道，甘草对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均有明显的抑菌作用。所以我们大胆的设想并通过进一步的探究，将甘草的水提液应用与香皂的制备中。由于市售香皂大部分含有非清真类油脂，不符合伊斯兰教宗教信仰，故为满足伊斯兰群众的信仰理念，为让其能使用到清真香皂，本实验采用牛油、椰子油、棕榈油和橄榄油及抑菌程度好的甘草进行研究，从而制备出一种新型甘草香皂。
1 实验材料
1.1 器材
烧瓶、玻璃棒、温度计、小刀、铁器杯子、98-1-B型电子调温电热套、铁架台、香皂磨具、滴管、搅拌器、试管、勺子、电热板、铁盘、橡皮手套、滤纸、电子称、电磁炉、冰箱。
1.2 抑菌设备
洁净工作台（SW-CJ-2FD），苏州安泰空气技术有限公司，洁净度：100级；数控超声波清洗器（KQ-500DA），昆山市超声仪器有限公司；电热鼓风干燥箱（DHG-9075A），上海一恒科学仪器有限公司；立式压力蒸汽灭菌器（LDZX-50KBS），上海申安医疗器械厂；恒温摇床（HS-200B），上海和呈医疗器械有限公司。
1.3 药材
乌拉尔甘草切片（购于银川市兴庆区古方大药房）。
1.4 原料及试剂
牛油（购于蔬菜市场）；椰子油﹑棕榈油﹑橄榄油（DIY手工皂原料基础油，产于江苏苏州）；氢氧化钠（天津市化学试剂三厂，批号：860314）；十二烷基苯磺酸钠（K12，上海白猫股份有限公司，工业级）；蒸馏水（宁夏医科大学药化实验室）；柠檬酸、二氧化钛、氯化钠、丁羟甲苯（天津市东华化学试剂厂，分析纯）；香精（广州百花香精香料有限公司，食品级）。
1.5 实验菌株
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌（宁夏医科大学检验学院实验中心）。
1.6 培养基
MH（配量27g/1000ml，杭州天河微生物试剂有限公司，生产批号：080731）；MH琼脂培养基（配量54g/1000ml，杭州天河微生物试剂有限公司，生产批号：080810）；营养琼脂（货号：02-276，北京奥博星生物技术有限公司）；营养肉汤（货号：02-013，北京奥博星生物技术有限公司）。
2 实验方法
2.1 处方工艺研究
2.1.1 甘草药液的提取
取甘草切片50g，放入1000ml的平底烧瓶中，量取880ml的蒸馏水，并置于电热套中加热，将温度先调至100℃沸腾之后，再调至50℃进行煎煮，煎煮1h，趁热抽虑，收集药液，药渣重复上述操作煎煮两次，混合三次药液，即为甘草提取液。
2.1.2 甘草香皂油脂的比例及配方
在处方研究过程中，油脂比例直接影响香皂的软硬程度，故是香皂成型的关键所在。各油脂的皂化值及硬度见表1，各油脂的重量及百分比见表2，甘草香皂的配方见表3。
其中：加入NaOH的量=油脂€自砘？
水量=（油脂总质量€？8）/72
2.1.3 甘草香皂的制备工艺
皂化：将牛油、椰子油、棕榈油以及橄榄油按比例混合并加热，充分混匀并保持温度在45℃左右。配制30%氢氧化钠溶液，用玻璃棒搅拌控制温度在45℃左右，缓慢加入油液中，不断搅拌数分钟，直至皂液成粘稠的糊状。
加入添加剂：将二氧化钛溶于甘草水提液中，待完全溶解后加入至粘稠状皂液中，边加边搅拌，待搅拌均匀后继续加入十二烷基苯磺酸钠、柠檬酸、氯化钠等添加剂，充分搅拌，最后加入丁羟甲苯及适量香精。
成型：充分搅拌后将皂基注入模具中冷却，原封不动的在温暖的地方放置1-2天。待凝固后从模具中取出，放在通风处，避开日光直晒，即成型。
2.2 抑菌效果评价
2.2.1 培养基的配制
营养琼脂：取琼脂3.2g于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min，分装至培养皿中，制得琼脂平板备用。
MH肉汤（单料）：取本品2.7g于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min，备用。
MH肉汤（双料）：取本品5.4g于入100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min，备用。 营养肉汤（NB）：取本品1.8g于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解， 121℃高压灭菌15 min备用。
生理盐水：取0.9gNacl于100ml蒸馏水中，搅拌煮沸溶解，121℃高压灭菌15 min备用。
2.2.2 受试菌液制备
将受试菌株接种于上述制备所得的培养基中，37℃，60rpm培养18-24h，无菌生理盐水校正浓度至107-108CFU/ml（菌落形成单位），即为供试菌的菌悬液。
取各个菌落分装在3ml的MH肉汤（双料）中，放置于摇床，37℃，60rpm培养6h，即为受试菌菌液。
取各受试菌菌液30？l接种于30ml营养肉汤中，放置于摇床，37℃，50rpm，培养6h。
2.2.3 供试品溶液配制
取上述制备所得的香皂成品1g，溶于5mlMH肉汤（双料）中，振摇混匀备用。
2.2.4 操作流程
于1-4号试管中均加入供试液1ml，MH单料1ml，并分别加入100ul的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌。于5-8号试管中均加入2mlMH肉汤（单料），并分别加入100ul的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌。于9号试管中加入2mlMH肉汤（单料）。
将1-9号试管均放置于摇床，37℃，60rpm中，培养16～18h。于无菌操作台上将各试管中的培养液接种于培养基，置37℃恒温摇床中培养16～18h，观察菌落的生长状况。平行做3次，以2次或3次相同结果为准。
3 结果与讨论
3.1 处方工艺研究
经处方工艺研究，最终制得硬度适宜、光滑美观﹑香味怡人、起泡效果良好的甘草香皂。在处方的筛选过程中，（1）为使产品适用于伊斯兰教人群，特选用清真的油脂制备香皂；（2）要制备硬度适宜的香皂，油脂的比例是制皂过程的关键所在；（3）为使所制得的香皂光滑美观、香味怡人、性质稳定，查阅文献[6]、[7]并经过多次实验，最终确定添加剂的选择和用量。
3.2 抑菌效果评价
以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌作为受试菌株进行体外抑菌实验，观察菌落的生长状况，见表4。
由表4可以看出，供试组加入上述甘草香皂，大肠杆菌所在的培养基中有极少量的菌落生长，金黄色葡萄球菌所在的培养基中无菌落生长，白色念球菌所在的培养基中无菌落生长，绿脓杆菌所在的培养基中无菌落生长。
对照组未加入甘草香皂，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌、绿脓杆菌所在的各个培养基中均有菌落生长。
空白组中未加入甘草香皂及受试菌株，各个培养基种均无任何现象。
4 结论
本实验采用甘草提取液制备所得的香皂不仅光滑美观，起泡效果好，而且对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌四种受试菌株均有良好的抑菌作用。本香皂处方及制备工艺均遵循伊斯兰教信仰理念，适用于伊斯兰教人群。在提高少数民族生活质量，促进民族地区发展方面具有一定意义。
参考文献：
[1] 邹振海.试论透明香皂的制备方法和理念[J].科技资讯，2012（26）：210.
[2] 郭莹.前景堪忧的香皂市场[J].上海综合经济，1997（4）：41.
[3] 张连学，张黎明，王娟，等.甘草在化妆品中的应用[J].香精香料化妆品，2010，8（4）：45.
[4] 王建国，周忠，刘海峰，等.甘草的活性成分及其在化妆品中国的应用[J].日用化学用品，2004，34（4）：249.
[5] 丁长玲，邱世翠，宫照龙，等.甘草的体外抑菌作用研究[J].时珍国医国药，2002，13（9）：518.
[6] 步健飞.肥皂的油脂配方问题[J].日用化学工业，1982（4）：5-6.
[7] 杨卫国.复合皂基型液体香皂技术要点和配方设计[J].江苏氯碱，2009，12（6）：16-18.