背景:脐带间充质干细胞可在体内外诱导分化为肝样细胞,然而确切机制目前尚不清楚,研究表明Wnt/β-catenin信号通路与之密切相关。目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路对脐带间充质干细胞肝向分化的影响及其机制。方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带间充质干细胞,将培养至第4-6代脐带间充质干细胞分成4组,分别为对照组,常规诱导肝向分化组,激活剂Wnt3a组(在常规诱导肝向分化基础上加入20μg/L Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a),抑制剂Dkk-1组(在常规诱导肝向分化基础上加入20μg/L Wnt/β-catenin信号通路抑制剂Dkk-1)。分别在诱导第7,14,21,28天收集细胞,采用荧光定量PCR和Western blot检测肝细胞分化相关基因的m RNA和蛋白表达。运用PAS染色、LDL摄取实验、ICG吸收实验在诱导第28天时进行肝样细胞功能检测。结果与结论:(1)与对照组相比,常规诱导组、激活剂Wnt3a组、抑制剂Dkk-1组中除了CK-19 mRNA及蛋白表达均下调外(P<0.01),AFP、ALB、HNF4α mRNA和AFP、HNF4α蛋白表达均显著上调(P<0.05);(2)与常规诱导组相比,激活剂Wnt3a组AFP、ALB、HNF4α mRNA及AFP、HNF4α蛋白表达均显著下调(P<0.05);(3)与常规诱导组、激活剂Wnt3a组相比,抑制剂Dkk-1组AFP、ALB、HNF4α mRNA及AFP、HNF4α蛋白表达显著增高(P<0.05);(4)抑制剂Dkk-1组PAS染色、LDL摄取实验、ICG吸收实验中检测到的阳性细胞最多,常规诱导组其次,阳性细胞最少的是激活剂Wnt3a组;(5)以上结果表明,Wnt/β-catenin信号通路受抑制时可促进脐带间充质干细胞肝向分化,反之,则抑制脐带间充质干细胞肝向分化。