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为了改善海藻酸钠固定化酶微球的扩散性与酶活稳定性,以纳米二氧化钛修饰海藻酸为固定化酶载体,Ca2+, Ce3+, Ni2+, Cu2+和Fe3+为杂化凝胶的阳离子交联剂,木瓜蛋白酶为模型酶,制备固定化酶微球.通过UV-Vis光谱检测酶活,考察了5种交联剂对固定化酶的动力学和稳定性的影响,结果表明:当Cu2+为交联剂时,固定化酶具有最高的亲和性、最低的米氏常数(Km =11.0 mg/mL)和最高的稳定性.研究了TiO2与木瓜蛋白酶的质量比对固定化酶稳定性以及酶蛋白泄漏的影响,结果显示纳米二氧化钛与木瓜蛋白