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为了获得低成本的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶（TLL）,在5L发酵罐发酵中对工程菌E.coliBL21（DE3）/pET28b-TLL的分批补料发酵工艺进行研究。结果表明：以葡萄糖为碳源的补料培养基,采用溶氧（DO）反馈补料策略进行补料,当OD600=60时降温至28℃,分2次加入终质量浓度为30g/L乳糖进行诱导表达。优化后TLL的表达量提高到798.5U/L,是优化前的2.4倍。本研究为规模化发酵重组菌生产TLL奠定了基础。