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目的探讨人表皮干细胞的体外分离培养方法，并对培养的表皮干细胞进行鉴定。方法运用中性蛋白水解酶和胰蛋白酶两步法分离表皮层和真皮层，并获得表皮单细胞悬液，采用Ⅳ型胶原铺板选择性黏附分离角质形成细胞，应用表皮干细胞培养基进行培养。倒置显微镜下观察培养细胞的生长状况，免疫组织化学染色观察表皮干细胞B1整合素、角蛋白19（K19）、CK10的表达。结果组织学观察显示，培养中实验组细胞呈现克隆生长，且克隆维持时间较长；免疫组织化学染色显示，实验组的培养细胞B1整合素及K19均呈阳性表达，而CK10阴性表达。结论应用Ⅳ