PNPLA3基因I148M多态性对肝癌细胞株Huh-7细胞周期的影响

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目的

探讨PNPLA3基因I148M多态性对人肝癌细胞株Huh-7细胞周期的影响及其相关机制。

方法

利用构建成功的稳定表达PNPLA3基因野生型和PNPLA3基因I148M突变型的Huh-7细胞株,以空载体细胞为对照,流式细胞术检测转染的Huh-7细胞周期,Western blot方法检测细胞周期调节因子Cyclin D1、p53的蛋白表达情况。荧光定量PCR检测Cyclin D1、p53的mRNA表达情况。两组间比较用独立样本t检验。

结果

三组间各细胞周期细胞所占比例的两两比较显示野生型组细胞周期G1期(58.53%±0.35%),G2/M期(24.87%±0.60%),S期(16.60%±0.26%)参数与对照组对应各期(G1期59.27%±0.15%;G2/M期24.23%±0.31%;S期16.50%±0.26%)之间差异无统计学意义(P > 0.05);突变型组与野生型组相比,G1期细胞比例减少(突变型G1期38.37%±0.21%,P < 0.05),S期与G2/M期细胞比例相应增加(突变型S期27.47%±0.35%,G2/M期34.17%±0.15%,P < 0.05)。与对照组相比,突变型组的p53 mRNA相对表达量明显上调(对照组1.06±0.41,突变型组6.54±0.34;P < 0.05);野生型组p53 mRNA相对表达量差异无统计学意义(1.66±0.30,P > 0.05)。Cyclin D1 mRNA各组中的相对表达量差异均无统计学意义(对照组1.00±0.10,野生型组1.06±0.03,突变型1.11±0.04;P > 0.05)。

结论

PNPLA3基因I148M多态性通过上调p53的表达引起Huh-7细胞周期紊乱。

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