【摘 要】
：
目的 构建溶瘤性单纯疱疹病毒( oHSV)易感的C57/BL小鼠黑色素瘤细胞系B16RHSV,同时仍保留其在小鼠体内诱导肿瘤生长的能力.方法 以人黑色素瘤细胞系A375的基因组DNA为模板,采
【机 构】
：
中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所免疫室, 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所内科,南开大学生命科学学院
论文部分内容阅读
目的 构建溶瘤性单纯疱疹病毒( oHSV)易感的C57/BL小鼠黑色素瘤细胞系B16RHSV,同时仍保留其在小鼠体内诱导肿瘤生长的能力.方法 以人黑色素瘤细胞系A375的基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增出疱疹病毒侵入介体(HVEM),将扩增产物克隆到pGEM-T Easy载体中并测序.将测序正确的HVEM基因克隆入pcDNA3质粒载体,产生pcDNA3-HVEM.以pcDNA3-HVEM质粒载体转染C57/BL小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10,使用含有GG418的完全培养基筛选可能的阳性克隆,并通过免疫磁珠筛选出表达HVEM的细胞,命名为B16RHSV.用表达绿色荧光蛋白(GFP)的oHSV( oHSVGFP)与B16RHSV细胞体外共培养,观察细胞病变效应和GFP的表达情况.分别以相同剂最的B16-F10和B16RHSV细胞接种于C57/BL小鼠右侧背部皮下,观察这两种细胞诱导小鼠体内形成肿瘤的能力.结果 在荧光显微镜下可观察到B16RHSV细胞表达绿色荧光并出现细胞病变效应,证明B16RHSV细胞能够被oHSV感染并在细胞内繁殖,而其亲代细胞B16-F10则不能.B16RHSV和B16-F10细胞接种于小鼠5d后,两组小鼠均可观察到肿瘤生长,且肿瘤生长情况基本一致.用oHSVGFP治疗两种细胞的荷瘤鼠,仅在B16RHSV细胞荷瘤的小鼠体内显示出明显的溶瘤效应.结论 构建的B16RHSV是对oHSV易感、保持体内成瘤性的小鼠黑色素瘤细胞系.
其他文献
钻孔灌注桩施工是整个建筑工程的前提与条件，施工质量的高低决定着工程的社会效益与经济效益。文章在对灌注桩施工工艺及关键施工节点进行分析的基础之上，探讨灌注桩常见典型问
在建筑施工过程中，经常出现地下室外墙裂缝的现象，因此，加强这方面的研究工作尤为重要。本文通过分析地下室外墙裂缝产生的原因，提出一些防治及处理措施，并结合工作实际经验，探讨建
由于公路桥梁工程项目的快速发展，技术更新周期越来越快，而且还涉及到多个学科，多个管理部门，这时，我们对于施工技术、管理方面的认识与研究已经远远落后，使得我们在施工现场频繁的
一、工程概况 锦绣江山国际湿地旅游城马术俱乐部室内遛马场位于山东省莱西市姜山镇，锦绣江山国际湿地旅游度假村内，长66m，上部为30m 的大跨度桁架屋盖，屋盖通过支座支撑在砼
目的 了解广州市番禺地区褐云玛瑙螺和福寿螺广州管圆线虫感染情况.方法 用人工胃液消化法对采集到的褐云玛瑙螺和福寿螺进行处理,镜下观察和计数广州管圆线虫第3期幼虫,比
目的 分析肝脓肿患者肝脏损害的临床特点、病原学、诊断和治疗.方法 回顾性分析1995年1月至2011年12月北京大学第一医院住院治疗的181例成人肝脓肿患者的人口学资料和临床资
10月29日，由中国资源综合利用协会墙材革新工作委员会联合中国建筑砌块协会、中国散装水泥推广发展协会和中国砂石协会共同举办的全国建筑废弃物资源化再利用经验现场交流会在
为全面贯彻执行《四川省城乡环境综合治理条例》“第二十六条城市、县人民政府规定的限制区域内，禁止建设施工单位在施工现场搅拌混凝土、砂浆。违反上述规定的将责令限期改正
目的 比较使用西洛他唑、阿司匹林、氯吡格雷三联抗血小板治疗与阿司匹林、氯吡格雷二联治疗在老年患者药物洗脱支架置入术后的疗效和安全性. 方法 前瞻性将234例入选的老年
目的 探讨妊娠合并慢性肾脏疾病患者的围产结局,以及不良围产结局的相关危险因素.方法 回顾性分析北京大学人民医院1998年1月至2010年8月收治的48例妊娠合并慢性肾脏疾病患者