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hFAK基因重组质粒的构建及蛋白表达

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hellolvkui

【摘 要】

：

目的构建hFAK原核、真核表达载体,证实融合蛋白在原核细胞的诱导表达以及在胃癌细胞内的表达、定位。方法提取人胃癌细胞SGC-7901的总mRNA并进行反转。以反转录的cDNA为模板P

【作 者】

：

李晓东 郭冰玉 朱戈 李丰 

【机 构】

：

中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室

【出 处】

：

中国医科大学学报

【发表日期】

：

2011年7期

【关键词】

：

hFAK 蛋白质印迹 融合蛋白 免疫荧光 胃癌 hFAK  Western blot  fusion protein  immunofluorescence 

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目的构建hFAK原核、真核表达载体,证实融合蛋白在原核细胞的诱导表达以及在胃癌细胞内的表达、定位。方法提取人胃癌细胞SGC-7901的总mRNA并进行反转。以反转录的cDNA为模板PCR扩增hFAK全长编码基因,分别克隆至pCDNA3.1-Flag以及pGEX-4T-2表达载体中。原核重组质粒鉴定后转入BL21细胞中并经过诱导表达及纯化,真核表达质粒转入胃癌SGC-7901细胞中,分别利用Western blot和激光共焦扫描显微技术检测重组质粒的表达以及在胃癌细胞中的定位。结果 hFAK全长基因序列克隆

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