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【摘要】 目的：探讨EGFR在晚期非小细胞肺癌化疗患者中的表达与预后的关系。方法：选取本院收治的非小细胞肺癌化疗患者50例为观察组，同期行手术治疗的部分肺良性病变患者23例为对照组。分析两组患者肺组织中EGFR的表达情况。结果：观察组中EGFR的表达百分数明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；不同组织类型患者EGFR的表达差异无统计学意义（P>0.05）；Ⅳ期患者EGFR的表达百分数明显高于Ⅲ期患者，差异有统计学意义（P<0.05）；中-高分化者EGFR的表达百分数明显高于低分化，差异有统计学意义（P<0.05）；EGFR表达水平<50%者5年生存率明显高于EGFR表达水平≥50%者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：EGFR表达在晚期NSCLC化疗患者中明显提高，与患者分期及分化程度密切相关，且可作为判断患者预后的指标之一。
【关键词】 表皮生长因子受体； 非小细胞肺癌； 预后
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.03.041
肺癌是发病率和病死率最高的恶性，其中非小细胞肺癌 （non-small cell lung cancers，NSCLC） 约占肺癌的80%[1]。虽然近年来NSCLC的治疗水平有了较大的进步，但其总体治愈率在较低水平。探索NSCLC的分子生物学特征，可以在一定程度上显示肿瘤的生物学特性、对治疗的反应、转移能力及预后等信息，且特异性高的标志物还可为临床提供新的诊断手段。表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）是表达于细胞膜表面的糖蛋白受体，调控细胞的生长、分化、血管生成及凋亡抑制，其信号通路与肿瘤的恶性生物学行为有直接关系[2]。本研究通过检测NSCLC组织中EGFR的表达情况，探讨EGFR与NSCLC患者的预后关系。报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2006年1月-2009年1月本院收治的NSCLC患者50例，均病理确诊，初次经手术治疗，未进行放疗，术后选用NSCLC一线化疗方案进行化疗（铂类+紫杉醇、长春瑞滨或吉西他滨），其中男34例，女16例，年龄53～75岁，
平均（62.37±11.41）岁；病理分期：Ⅲ期患者
29例，Ⅳ期患者21例；病理分型：腺癌24例，鳞癌21例，腺鳞癌4例；分化程度：低分化12例，中-高分化38例。选取同期本院收治的行手术治疗的部分肺良性病变患者23例为对照组，其中男15例，女8例；年龄51～70岁，平均（58.94±9.08）岁；疾病类型：结核病11例，错构瘤4例，肺囊肿3例，炎性假瘤5例。两组患者的一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法 两组患者均于术中取相应肺组织作为标本，采用免疫组织化学方法（SP法）检测EGFR的表达，EGFR抗体为兔抗人单克隆抗体，工作液浓度为1∶100，由北京中杉金桥生物技术有限公司提供，用PBS代替一抗作阴性对照。所有患者均于手术当天开始随访，采用电话随访或患者来院复查，随访时间截止至2014年1月31日，生存期为手术日至随访截止时间或死亡时间。
1.3 阳性结果判定标准 位于胞浆及胞膜上的棕黄色颗粒判定为EGFR阳性染色[3]，每例标本在400倍视野下随即选取500个肿瘤细胞，计算阳性细胞所占的比例。
1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0统计学软件分析数据，计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料以百分比表示，比较采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者EGFR表达的比较 观察组中EGFR的表达百分数为（58.69±27.41）%，对照组中EGFR的表达百分数为（9.87±8.09）%，差异有统计学意义（P<0.05）。
2.2 不同类型NSCLC患者EGFR表达比较 腺癌EGFR表达百分数为（49.43±18.92）%，鳞癌为（53.07±20.84）%，腺鳞癌为（57.61±19.68）%，不同组织类型患者EGFR的表达差异无统计学意义（P>0.05）；Ⅳ期患者EGFR的表达百分数为（68.96±27.25）%，明显高于Ⅲ期患者的（59.62±23.34）%，差异有统计学意义（P<0.05）；中-高分化患者EGFR的表达百分数为（64.45±19.92）%，明显高于低分化患者的（54.37±28.91）%，差异有统计学意义（P<0.05）。
2.3 EGFR表达与NSCLC患者生存期的关系 根据随访结果显示，EGFR表达水平<50%者5年生存率为32.47%，EGFR表达水平≥50%者5年生存率为19.07%，两者比较差异有统计学意义（P<0.05）。
3 讨论
现有的研究表明肺癌的发生、发展和转移与许多分子信号通路异常有关[4]。EGFR是一种细胞膜表面的糖蛋白受体，是原癌基因C-erbB-1（HER21）的表达产物，具有酪氨酸激酶活性，其表达与否与细胞特异性分化有关。EGFR的胞内有许多酪氨酸残基，经磷酸化后可与下游蛋白特异性结合，进而启动EGFR信号通路，完成细胞信号的传导与转移过程[5-6]。EGFR信号通路主要包括：配体诱导胞外域构象变化、胞内域形成激酶活性与下游信号激活、跨膜信号转导、信号灭活四部分[7]。通过介导这些通路，有效调节细胞增生、存活、黏附、迁移和分化，从而增加肿瘤细胞的侵袭力、抑制肿瘤细胞的凋亡、促进血管生成[8-9]。肺癌转移是影响预后的重要因素，约80%～90%的肺癌患者是由转移引起死亡的[10]。EGFR高表达可引起细胞分化异常，降低细胞间黏附力，肿瘤易发生淋巴道转移及远处转移[11]。
本研究结果中，观察组中EGFR的表达百分数明显高于对照组（P<0.05），说明NSCLC肺癌组织中EGFR的表达水平明显增高。不同组织类型患者EGFR的表达差异无统计学意义（P>0.05），说明EGFR的表达与病理类型无关，主要是因为不论是何种类型的NSCLC，EGFR均可与其配体结合，促使细胞分裂增殖所必须酶、蛋白质的合成。肿瘤生长过程中，因其处于生长活跃期，EGFR基因转录增加，使得高分化、分期高的肿瘤中出现高表达。本研究结果显示，Ⅳ期患者EGFR的表达百分数明显高于Ⅲ期患者，中-高分化者EGFR的表达百分数明显高于低分化，差异均有统计学意义（P<0.05），这与相关报道的结果一致，说明EGFR的表达水平与NSCLC的分期及分化程度密切相关。此外，EGFR表达水平<50%者5年生存率明显高于EGFR表达水平≥50%者，提示检测NSCLC肺癌组织中EGFR的表达水平有助于评估患者的预后。 综上，EGFR表达在晚期NSCLC化疗患者中明显提高，与患者分期及分化程度密切相关，且可作为判断患者预后的指标之一。
参考文献
[1] James R.Screening and early detection of lung cancer[J].Lung Cancer，2003，41（Suppl 3）：52-57.
[2] Selvaggi G，Novello S，Torri V，et al.Epidermal growth factor receptor overexpression correlates with a poor prognosis in completely resected non-small-cell lung cancer[J].Ann Oncol，2004，15（1）：28-32.
[3] Varella-Garcia M，Diebold J，Eberhard D A，et al.EGFR fluores cence in situ hybridisation assay：guidelines for application to non-small-cell lung cancer[J].J Clin Pathol，2009，62（11）：970-977.
[4] 刘峰，姜斌，龚圣济，等.中国人非小细胞肺癌EGFR和K-RAS基因突变情况的研究[J].中华医学遗传学杂志，2007，24（1）：31-34.
[5] Sequist L V，Martins R G，Spigel D，et al.First-line gefitinib in patients with advanced non-small-cell lung cancer harboring somatic EGFR mutations[J].J Clin Oncol，2008，26（15）：2442-2449.
[6]张晓晶，徐惠绵，刘云鹏，等.EGFR信号通路调节A375细胞侵袭转移分子机制探讨[J].中国肿瘤临床，2006，33（7）：361-366.
[7] Shimato S，Mitsudomi T，Kosaka T，et al.EGFR mutations in patients with brain metastases from lung cancer：association with the efficacy of gefitinib[J].Neuro Oncol，2006，8（2）：137-144.
[8] Dziadziuszko R，Witta S E，Cappuzzo F，et al.Epidermal growth factor receptor messenger RNA expression，gene dosage，and gefitinib sensitivity in non-small-cell lung cancer[J].Clin Cancer Res，2006，12（10）：3078-3084.
[9] Lynch T J，Bell D W，Sordella R，et al.Activating mutations in the epidermal growth factor receptor underlying responsiveness of non-small-cell lung cancer to gefitinib[J].N Engl J Med，2004，350（21）：2191-2193.
[10] 陈万青，张思维，李连弟，等.中国部分市县1998-2002年肺癌的发病与死亡[J].中国肿瘤，2006，9（15）：570-574.
[11] Dahabreh I J，Linardou H，Kosmidis P，et al.EGFR gene copy number as a predictive biomarker for patients receiving tyrosine kinase inhibitor treatment：a systematic review and meta analysis in non-small-cell lung cancer[J].Ann Oncol，2011，22（3）：545-552.
（收稿日期：2015-05-22） （本文编辑：蔡元元）
【关键词】 表皮生长因子受体； 非小细胞肺癌； 预后
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.03.041
肺癌是发病率和病死率最高的恶性，其中非小细胞肺癌 （non-small cell lung cancers，NSCLC） 约占肺癌的80%[1]。虽然近年来NSCLC的治疗水平有了较大的进步，但其总体治愈率在较低水平。探索NSCLC的分子生物学特征，可以在一定程度上显示肿瘤的生物学特性、对治疗的反应、转移能力及预后等信息，且特异性高的标志物还可为临床提供新的诊断手段。表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）是表达于细胞膜表面的糖蛋白受体，调控细胞的生长、分化、血管生成及凋亡抑制，其信号通路与肿瘤的恶性生物学行为有直接关系[2]。本研究通过检测NSCLC组织中EGFR的表达情况，探讨EGFR与NSCLC患者的预后关系。报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2006年1月-2009年1月本院收治的NSCLC患者50例，均病理确诊，初次经手术治疗，未进行放疗，术后选用NSCLC一线化疗方案进行化疗（铂类+紫杉醇、长春瑞滨或吉西他滨），其中男34例，女16例，年龄53～75岁，
平均（62.37±11.41）岁；病理分期：Ⅲ期患者
29例，Ⅳ期患者21例；病理分型：腺癌24例，鳞癌21例，腺鳞癌4例；分化程度：低分化12例，中-高分化38例。选取同期本院收治的行手术治疗的部分肺良性病变患者23例为对照组，其中男15例，女8例；年龄51～70岁，平均（58.94±9.08）岁；疾病类型：结核病11例，错构瘤4例，肺囊肿3例，炎性假瘤5例。两组患者的一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法 两组患者均于术中取相应肺组织作为标本，采用免疫组织化学方法（SP法）检测EGFR的表达，EGFR抗体为兔抗人单克隆抗体，工作液浓度为1∶100，由北京中杉金桥生物技术有限公司提供，用PBS代替一抗作阴性对照。所有患者均于手术当天开始随访，采用电话随访或患者来院复查，随访时间截止至2014年1月31日，生存期为手术日至随访截止时间或死亡时间。
1.3 阳性结果判定标准 位于胞浆及胞膜上的棕黄色颗粒判定为EGFR阳性染色[3]，每例标本在400倍视野下随即选取500个肿瘤细胞，计算阳性细胞所占的比例。
1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0统计学软件分析数据，计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料以百分比表示，比较采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者EGFR表达的比较 观察组中EGFR的表达百分数为（58.69±27.41）%，对照组中EGFR的表达百分数为（9.87±8.09）%，差异有统计学意义（P<0.05）。
2.2 不同类型NSCLC患者EGFR表达比较 腺癌EGFR表达百分数为（49.43±18.92）%，鳞癌为（53.07±20.84）%，腺鳞癌为（57.61±19.68）%，不同组织类型患者EGFR的表达差异无统计学意义（P>0.05）；Ⅳ期患者EGFR的表达百分数为（68.96±27.25）%，明显高于Ⅲ期患者的（59.62±23.34）%，差异有统计学意义（P<0.05）；中-高分化患者EGFR的表达百分数为（64.45±19.92）%，明显高于低分化患者的（54.37±28.91）%，差异有统计学意义（P<0.05）。
2.3 EGFR表达与NSCLC患者生存期的关系 根据随访结果显示，EGFR表达水平<50%者5年生存率为32.47%，EGFR表达水平≥50%者5年生存率为19.07%，两者比较差异有统计学意义（P<0.05）。
3 讨论
现有的研究表明肺癌的发生、发展和转移与许多分子信号通路异常有关[4]。EGFR是一种细胞膜表面的糖蛋白受体，是原癌基因C-erbB-1（HER21）的表达产物，具有酪氨酸激酶活性，其表达与否与细胞特异性分化有关。EGFR的胞内有许多酪氨酸残基，经磷酸化后可与下游蛋白特异性结合，进而启动EGFR信号通路，完成细胞信号的传导与转移过程[5-6]。EGFR信号通路主要包括：配体诱导胞外域构象变化、胞内域形成激酶活性与下游信号激活、跨膜信号转导、信号灭活四部分[7]。通过介导这些通路，有效调节细胞增生、存活、黏附、迁移和分化，从而增加肿瘤细胞的侵袭力、抑制肿瘤细胞的凋亡、促进血管生成[8-9]。肺癌转移是影响预后的重要因素，约80%～90%的肺癌患者是由转移引起死亡的[10]。EGFR高表达可引起细胞分化异常，降低细胞间黏附力，肿瘤易发生淋巴道转移及远处转移[11]。
本研究结果中，观察组中EGFR的表达百分数明显高于对照组（P<0.05），说明NSCLC肺癌组织中EGFR的表达水平明显增高。不同组织类型患者EGFR的表达差异无统计学意义（P>0.05），说明EGFR的表达与病理类型无关，主要是因为不论是何种类型的NSCLC，EGFR均可与其配体结合，促使细胞分裂增殖所必须酶、蛋白质的合成。肿瘤生长过程中，因其处于生长活跃期，EGFR基因转录增加，使得高分化、分期高的肿瘤中出现高表达。本研究结果显示，Ⅳ期患者EGFR的表达百分数明显高于Ⅲ期患者，中-高分化者EGFR的表达百分数明显高于低分化，差异均有统计学意义（P<0.05），这与相关报道的结果一致，说明EGFR的表达水平与NSCLC的分期及分化程度密切相关。此外，EGFR表达水平<50%者5年生存率明显高于EGFR表达水平≥50%者，提示检测NSCLC肺癌组织中EGFR的表达水平有助于评估患者的预后。 综上，EGFR表达在晚期NSCLC化疗患者中明显提高，与患者分期及分化程度密切相关，且可作为判断患者预后的指标之一。
参考文献
[1] James R.Screening and early detection of lung cancer[J].Lung Cancer，2003，41（Suppl 3）：52-57.
[2] Selvaggi G，Novello S，Torri V，et al.Epidermal growth factor receptor overexpression correlates with a poor prognosis in completely resected non-small-cell lung cancer[J].Ann Oncol，2004，15（1）：28-32.
[3] Varella-Garcia M，Diebold J，Eberhard D A，et al.EGFR fluores cence in situ hybridisation assay：guidelines for application to non-small-cell lung cancer[J].J Clin Pathol，2009，62（11）：970-977.
[4] 刘峰，姜斌，龚圣济，等.中国人非小细胞肺癌EGFR和K-RAS基因突变情况的研究[J].中华医学遗传学杂志，2007，24（1）：31-34.
[5] Sequist L V，Martins R G，Spigel D，et al.First-line gefitinib in patients with advanced non-small-cell lung cancer harboring somatic EGFR mutations[J].J Clin Oncol，2008，26（15）：2442-2449.
[6]张晓晶，徐惠绵，刘云鹏，等.EGFR信号通路调节A375细胞侵袭转移分子机制探讨[J].中国肿瘤临床，2006，33（7）：361-366.
[7] Shimato S，Mitsudomi T，Kosaka T，et al.EGFR mutations in patients with brain metastases from lung cancer：association with the efficacy of gefitinib[J].Neuro Oncol，2006，8（2）：137-144.
[8] Dziadziuszko R，Witta S E，Cappuzzo F，et al.Epidermal growth factor receptor messenger RNA expression，gene dosage，and gefitinib sensitivity in non-small-cell lung cancer[J].Clin Cancer Res，2006，12（10）：3078-3084.
[9] Lynch T J，Bell D W，Sordella R，et al.Activating mutations in the epidermal growth factor receptor underlying responsiveness of non-small-cell lung cancer to gefitinib[J].N Engl J Med，2004，350（21）：2191-2193.
[10] 陈万青，张思维，李连弟，等.中国部分市县1998-2002年肺癌的发病与死亡[J].中国肿瘤，2006，9（15）：570-574.
[11] Dahabreh I J，Linardou H，Kosmidis P，et al.EGFR gene copy number as a predictive biomarker for patients receiving tyrosine kinase inhibitor treatment：a systematic review and meta analysis in non-small-cell lung cancer[J].Ann Oncol，2011，22（3）：545-552.
（收稿日期：2015-05-22） （本文编辑：蔡元元）