【摘 要】
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采用硫酸铵分级沉淀、透析和DEAE-sepharose阴离子交换柱层析对松杉灵芝漆酶进行分离纯化并研究其部分酶学性质。结果表明,纯化漆酶比活力为55.438 7 U/mg,回收率为31.7%,相
【机 构】
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中国石油大学(华东)化学工程学院生物工程与技术中心; 福建农林大学生命科学学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.41276135);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-13-1031);福建省自然基金杰出青年项目(No.2014J06010);福建省食用菌产业重大研发平台(No.2014N2101);财政部、农业部重大农技推广项目(KNJ-153011-3)
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采用硫酸铵分级沉淀、透析和DEAE-sepharose阴离子交换柱层析对松杉灵芝漆酶进行分离纯化并研究其部分酶学性质。结果表明,纯化漆酶比活力为55.438 7 U/mg,回收率为31.7%,相对分子质量约为52 000。该酶催化底物ABTS的最适反应温度和最适反应pH值分别为40℃和4.0,在3040℃及pH 4.05.0范围内具有良好的稳定性。以ABTS为底物的米氏常数Km为0.909 mmol/L,vmax为454.5 mmol/(Lmin)。K+和Fe3+对漆酶具有明显的激活作用;NH4+、Cu2+对漆酶活性影响不大;Fe2+能完全抑制漆酶的活性。
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