研究转录因子特异蛋白1(specificity protein 1,SP1)对头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)细胞增殖、转移和侵袭的影响,以及SP1对微RNA(microRNA,miRNA)-92b的转录调节作用。
方法实验分为转染SP1干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)的实验组、转染阴性对照siRNA的阴性对照组和未做处理的空白对照组。应用生物信息学方法预测miRNA-92b的转录因子。采用染色质免疫共沉淀技术验证转录因子SP1与miRNA-92b基因启动子的结合位点。转染siRNA抑制SP1表达后,用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测SP1和miRNA-92b的表达变化。转染后进行细胞增殖实验、Transwell迁移和侵袭实验。
结果染色质免疫共沉淀技术表明miRNA-92b启动子区域有3个DNA片段位点与SP1结合。qPCR结果显示,实验组SP1在细胞PCI-4A和PCI-37A中的表达(分别为0.064±0.020和0.639±0.008)显著低于阴性对照组(均为1)(P<0.05),实验组miRNA-92b在细胞PCI-4A和PCI-37A中的表达(分别为0.215±0.033和0.497±0.104)均显著低于阴性对照组(均为1)(P<0.05)。实验组SP1在细胞PCI-4A和PCI-37A中增殖的A值均显著低于阴性对照组(P<0.05)。实验组SP1在细胞PCI-4A和PCI-37A中迁移细胞数(分别为37.0±4.6和40.7±2.1)均显著低于阴性对照组(分别为101.0±5.3和82.7±5.7)(P<0.05)。实验组SP1在细胞PCI-4A和PCI-37A中侵袭细胞数(分别为31.3±10.8和37.0±4.6)均显著低于阴性对照组(分别为92.3±3.1和70.3±3.1)(P<0.05)。
结论SP1是miRNA-92b的转录因子并直接参与miRNA-92b的转录调控;SP1可以促进HNSCC细胞增殖、迁移和侵袭的能力。