【摘 要】
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为了筛选出免疫原性最佳的基因Ⅰ型乙型脑炎病毒亚单位疫苗候选抗原,将基因Ⅰ型JEV GS株的prMEⅢ融合基因、polytope复合表位基因和prMEⅢ-polytope融合基因分别克隆构建到原
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州 730046;江苏省动物重要疫病与人兽共患病
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为了筛选出免疫原性最佳的基因Ⅰ型乙型脑炎病毒亚单位疫苗候选抗原,将基因Ⅰ型JEV GS株的prMEⅢ融合基因、polytope复合表位基因和prMEⅢ-polytope融合基因分别克隆构建到原核表达载体pET-30a上,经诱导表达纯化获得重组蛋白.将制备的重组蛋白免疫小鼠,通过ELISA监测体液免疫反应、通过噬斑减少中和试验滴定中和抗体滴度、通过细胞因子表达丰度和淋巴细胞增殖实验分析细胞介导的免疫反应,比较分析制备的乙型脑炎病毒亚单位疫苗候选抗原的免疫原性.结果 表明:获得的分子量分别为35 kDa (prMEⅢ)、28 kDa(polytope复合表位抗原)和57 kDa (prMEⅢ-polytope)的重组蛋白均能诱导免疫小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫反应.与prMEⅢ-polytope和polytope重组蛋白免疫组相比,prMEⅢ蛋白可诱导免疫小鼠产生更高的IL-2和IFN-γ表达丰度和淋巴细胞增殖水平(P＜0.05).prMEⅢ蛋白免疫小鼠诱导产生的中和抗体滴度接近于商品化乙脑减毒疫苗SA14-14-2 (P＞0.05).上述研究结果表明,prMEⅢ重组蛋白可以作为乙型脑炎病毒亚单位疫苗的备选蛋白.
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