银染mRNA差异显示方法的建立和二次扩增参数优化

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1992年Ling[1]等建立了差异反转录PCR技术(differential display reverse transcription PCR,DDRT-PCR),为差异表达基因的分离克隆提供了一个全新的思路,该技术由于需mRNA量少,且有简单、迅速、可同时比较多个样品等特点,成为目前分离差异表达基因广为采用的方法。原始DDRT-PCR以放射自显影成像,敏感性高,但也存在应用同位素所带来的诸多不便,使其应用受到限制。我们在选择应用该技术时,注意到近来出现的非放射性DDRT-PCR方法,如银染法、地高辛
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