【摘 要】
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目的：制备能在原核表达系统中表达并特异性识别（Asp）4-Lys序列的鼠源性肠激酶，为推广应用重组肠激酶提供技术平台。方法：采用RT-PCR从C57BL／6J小鼠的十：二指肠肠系膜黏膜组织中钓取
【机 构】
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吉林大学基础医学院分子生物学教研窒,吉林大学基础医学院免疫学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题(30070705)
论文部分内容阅读
目的：制备能在原核表达系统中表达并特异性识别（Asp）4-Lys序列的鼠源性肠激酶，为推广应用重组肠激酶提供技术平台。方法：采用RT-PCR从C57BL／6J小鼠的十：二指肠肠系膜黏膜组织中钓取肠激酶轻链的cDNA，将其克隆人pET32a原核表达载体中，并在大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达，然后以镍亲和层析法对表达产物进行纯化。结果：所钓取的肠激酶轻链编码序列与GenBank中的序列一致，比较发现其编码的氨基酸序列在小鼠与人、牛之间的同源性大于75％。利用pET32a／BL21（DE3）表达系统成功地
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