人RECK基因的克隆与表达

来源 :华中医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：simba_m

【摘要】

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目的克隆人RECK基因,构建其原核表达重组体,并进行初步表达.方法从人的胎盘组织中提取总RNA,经逆转录聚合酶链反应扩增出RECK基因;将RECK基因克隆入pGEM-T载体中,构建克隆载

【作者】

：

张勇郑启昌卢昕秦涛吕文利

【机构】

：

430022,430030

【出处】

：

华中医学杂志

【发表日期】

：

2005年1期

【关键词】

：

基因原核表达重组体 SK 阳性克隆逆转录聚合酶链反应体表 IPTG T载体高效表达 Gene expressionRECKAntibodies mon

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目的克隆人RECK基因,构建其原核表达重组体,并进行初步表达.方法从人的胎盘组织中提取总RNA,经逆转录聚合酶链反应扩增出RECK基因;将RECK基因克隆入pGEM-T载体中,构建克隆载体pGEM-RECK,阳性克隆经酶切、电泳鉴定,测定RECK基因序列并确认后,构建原核表达重组体pBluescriptSK+RECK,在工程菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达.结果PCR扩增得到了特异性的4.4 kb基因片段.基因片段的大小与预期一致.所获得的RECK基因测序正确,原核表达载体表达重组蛋白,经SDS

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