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目的:应用高效液相色谱法测定血液中甲氨蝶呤药物浓度,以指导临床用药.方法:采用NucleosilC18钢柱,甲醇/磷酸盐缓冲液(16/84)为流动相,紫外检测波长306 nm,微量血中,高氧酸沉淀蛋白,少量氢氧化钠调节酸度后,上清液进样分析.结果:MTX及代谢产物色谱分离理想,在0.1～20.0 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.999 9,在高、中、低4种浓度下,平均相对回收率为102.1%、101.2%、101.4%、99.48%,平均绝对回收率为94.68%、94.74%、91.89%、