C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响

来源 :中山大学学报(医学科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：zldzhang

【摘要】

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[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表

【作者】

：

马涛邱鹏新颜光美

【机构】

：

中山大学基础医学院药理学教研室

【出处】

：

中山大学学报(医学科学版)

【发表日期】

：

2005年4期

【关键词】

：

血重组蛇毒纤溶酶序列删除 C端 PASTORIS SDS-PAGE 热敏感性突变体 blot PCR方法胰岛素B链诱导表达生化特性生化分析裂解

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[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.[结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和r

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