【摘 要】
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目的 观察正常老化及应激诱导老化(stress-induced premature senescence,SIPS)的小鼠成纤维细胞在不同pH值条件下,衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactos
【机 构】
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复旦大学附属华东医院整形外科, 上海,200040
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目的 观察正常老化及应激诱导老化(stress-induced premature senescence,SIPS)的小鼠成纤维细胞在不同pH值条件下,衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)染色效果的变化规律.方法 取新生1～3 d C57BL/6小鼠背部皮肤成纤维细胞进行传代培养,UVB照射应激诱导老化细胞,以不同代次的细胞和应激诱导老化细胞为实验对象,进行衰老相关蛋白检测,并在不同pH条件下进行衰老相关β-半乳糖苷酶染色,对其着色情况进行观察和分析.结果 在P1代细胞、P6代细胞、应激诱导老化细胞和P12代细胞中,p53/p21蛋白表达依次增多;正常P1代细胞衰老相关β-半乳糖苷酶染色阴性,其余细胞组随着pH值的由低到高(6.0 ～8.0),着色情况均呈现由强到弱的变化趋势,P6细胞、SIPS细胞、P12细胞分别在pH7.0、7.5和8.0时阳性染色消失.结论 随着细胞衰老程度的增加,衰老相关β-半乳糖苷酶染色将在较高pH时才会呈现假阴性,提示染色时安全pH范围应根据细胞代次而定.
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