【摘 要】
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目的:构建髓系特异性Abro1(Abraxas brother 1)基因敲除小鼠,并初步分析其对小鼠造血系统及LPS诱导败血症的影响.方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre/LoxP重组系统构建Abro1flox/+小鼠,将Abro1flox/+雌雄小鼠自交,子代得到Abro1flox/flox基因型小鼠.Abro1flox/flox与Lyz2-Cre+小鼠交配,子代得到Abro1flox/+/Lyz2-Cre+小鼠,再将其与Abro1flox/flox交配,最终得到的Abro1flox/f
【机 构】
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天津大学化工学院制药工程系,天津300072;中国人民解放军军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,北京102206
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目的:构建髓系特异性Abro1(Abraxas brother 1)基因敲除小鼠,并初步分析其对小鼠造血系统及LPS诱导败血症的影响.方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre/LoxP重组系统构建Abro1flox/+小鼠,将Abro1flox/+雌雄小鼠自交,子代得到Abro1flox/flox基因型小鼠.Abro1flox/flox与Lyz2-Cre+小鼠交配,子代得到Abro1flox/+/Lyz2-Cre+小鼠,再将其与Abro1flox/flox交配,最终得到的Abro1flox/flox/Lyz2-Cre+小鼠为髓系特异性Abro1基因敲除小鼠,即MKO小鼠;Abro1flox/flox/Lyz2-Cre?小鼠作为野生型小鼠,即WT小鼠.提取WT和MKO小鼠尾基因组DNA,PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳鉴定其基因型.提取WT和MKO小鼠免疫细胞蛋白,Western blot检测ABRO1蛋白表达.流式细胞术分析小鼠骨髓和外周血免疫细胞组成,检测MKO小鼠对造血系统的影响.LPS处理WT和MKO小鼠3 h,检测血清中相关生化指标变化以及炎症因子分泌情况.结果:PCR和Western blot结果显示髓系特异性Abro1基因敲除小鼠构建成功.流式细胞术结果显示WT和MKO小鼠骨髓和外周血中髓系细胞(CD11b+、CD11b+Ly6G+、CD11b+Ly6C+)和淋巴细胞组成(CD3+、B220+)无差异.LPS诱导败血症实验中,MKO小鼠相关生化指标和炎症因子水平均低于WT小鼠,表明MKO小鼠可抵抗LPS诱导的败血症.结论:成功构建ABRO1 MKO敲除小鼠,发现MKO小鼠造血系统正常,但可抵抗LPS诱导的败血症,ABRO1 MKO小鼠的建立为揭示ABRO1在免疫细胞亚群中的差异性调控机制提供了良好的动物模型.
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胞内补体系统(ICS)是一个相对独立的可调控细胞代谢和功能的胞内生物效应系统.近年研究表明,ICS广泛存在于多种免疫细胞和非免疫细胞,在细胞静息态与激活态维持与转变、基本代谢与增殖分化、凋亡调控等方面具有重要作用.此外,通过对胞内补体的研究也加深了对受补体调节的胞内病原体的认识.更重要的是,胞内补体研究为治疗多种与补体有关的免疫性疾病提供了新的研究思路和方法.
目的 研究西南地区男性不育患者的染色体异常的发生率和类型,为临床诊断和治疗提供依据.方法 回顾性分析2017年8月至2020年11月来我院就诊的男性不育患者3657例,根据患者精液检查结果分为无精子症组1488例、严重少精子症组724例、少精子症组452例和正常对照组993例,所有患者同时进行染色体核型分析和Y染色体微缺失检测.结果 在2664例精子数异常的患者中共检出染色体核型异常242例(9.08％),其中性染色体异常189例(7.10％),常染色体异常53例(1.99％);检出染色体多态性核型131
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