目的:建立同时测定金蝉止痒胶囊中盐酸小檗碱、黄芩苷和蛇床子素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil BDS C18,流动相为甲醇-乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺(50∶30∶19∶1,V/V/V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为265 nm(盐酸小檗碱)、280 nm(黄芩苷)、322 nm(蛇床子素),柱温为30℃,进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱、黄芩苷和蛇床子素检测进样量线性范围分别为80~800 ng(r=0.999 8)、60~600 ng(r=0.999 9)、60~600 ng(r=0.999 6);定量限分别为80、60、60 ng,检测限分别为24、20、20 ng;中间精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%;加样回收率分别为97.4%~98.3%(RSD=0.33%,n=6)、98.4%~99.6%(RSD=0.42%,n=6)、96.9%~99.0%(RSD=0.92%,n=6);耐用性试验的RSD均小于1.2%。结论:该方法操作简便、准确,精密度、稳定性、重复性、耐用性好,可用于金蝉止痒胶囊中盐酸小檗碱、黄芩苷和蛇床子素含量的同时测定。