【摘 要】
：
目的真核表达、纯化人IgE重链恒定区2～4区(IgECε2-4)蛋白,利用表面等离子体共振技术(SPR)捕获其相互作用蛋白。方法构建3个含不同信号肽序列的IgECε2-4重组真核表达载体,分
【基金项目】
：
血液净化吸附产品关键共性技术攻关与产业化研究(201604046010)
论文部分内容阅读
目的真核表达、纯化人IgE重链恒定区2～4区(IgECε2-4)蛋白,利用表面等离子体共振技术(SPR)捕获其相互作用蛋白。方法构建3个含不同信号肽序列的IgECε2-4重组真核表达载体,分别瞬时转染HEK293FT悬浮细胞,优化选用表达量最高的重组质粒进行大量瞬转表达,镍柱亲和层析纯化。免疫荧光技术鉴定重组蛋白与KU812细胞表面IgE受体FcεRⅠ的结合,采用SPR技术捕捉人血清中与IgECε2-4相互作用的蛋白。结果含信号肽3(SP3)的重组质粒表达量最高,表达量约为6.2 mg/L;亲和纯化获得高纯度的人IgECε2-4蛋白;免疫荧光技术鉴定显示重组蛋白IgECε2-4可与KU812细胞表面受体结合。通过SPR技术捕获到人血清中39种可能与IgECε2-4结合的蛋白。结论获得纯化的重组蛋白IgECε2-4,IgECε2-4能与KU812细胞表面FcεR1α受体结合,靶标垂钓结果显示IgECε2-4能与人血清中的39种蛋白存在相互作用或有间接结合作用。
其他文献
ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
为顺应互联网+护理职业教育的发展潮流,提高儿科护理人才培养质量,在调研国内外网络课程开发与实施的基础上,本课程团队利用自主开发的教学平台构建高职儿科护理网络课程,通
生物化学因其作为生命科学各学科的交汇点而成为新世纪生命科学的领头学科。它是一门理论性和实践性都很强的学科。生物化学实验对学生掌握基本知识、基本技能，培养初步的科研
为了探讨小豆苗期抗旱性特点,建立抗旱性鉴定指标评价体系,筛选抗旱基因型材料,本研究以苗期盆栽控水方式,对不同来源的235份小豆种质资源进行了干旱胁迫试验。在测定其根系
胡锦涛总书记在同全国妇联新一届领导班子成员和妇女九大部分代表座谈时指出，各级党委和政府一定要充分认识妇女的重要作用和妇女工作的重大意义，牢固树立马克思主义妇女观，坚决
"因爱离魂"是古代小说创作的一个母题。这种母题的产生和流行,既与中国古代民族文化心理中的魂魄观念有着密切的关系,也与人类特有的爱情心理相契合。它以浪漫奇幻的方式叙写
随着虚拟现实技术的逐渐成熟,在旅游中的应用也逐渐成为旅游学界研究的议题。本文通过对研究虚拟旅游的50余篇核心论文进行分类研究,发现国内对虚拟旅游研究集中在虚拟旅游概
0~3岁婴幼儿教育已经引起了各界的关注,许多民间资本也进入了早期教育市场,呈现出一派欣欣向荣之貌,但也存在机构数量滞后,教学质量不高等问题。因此,应加强对早期教育的组织
当前,高职艺术类大学生思想政治教育面临着学生集体观念淡薄、组织纪律性差、人文素质不高、政治理论欠缺等挑战。以科学发展观为指导,通过树立以人为本的教育理念,借助职教