重叠延伸PCR法克隆重组复合干扰素

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目的:用重叠延伸PCR(overlap extensionPCR)法获得人工优化的干扰素-重组复合干扰素(consensus interferon,cIFN)基因,用原核表达系统对其进行表达,鉴定表达的cIFN活性.方法:根据大肠杆菌的偏爱密码子,人工设计cIFN的高表达基因,用overlap PCR法合成cIFN全基因,用基因重组技术构建其原核表达载体pRA—cIFN,在大肠杆菌BL21中进行高效表达,用SDS—PAGE和Westemblotting鉴定cIFN表达,用GuHCl阶段透析法进行蛋白变性、
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