星点设计效应面法优化赶山鞭总黄酮提取工艺及提取物指纹图谱研究

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目的 优化赶山鞭总黄酮的提取工艺,建立赶山鞭总黄酮提取物的指纹图谱。方法 通过单因素实验研究提取时间、提取次数、乙醇体积分数、料液比对赶山鞭中总黄酮含量及金丝桃苷的转移率的影响;以此为基础,采用Central-Composite试验设计原理进行3因素5水平试验设计和响应面分析法优化提取工艺。采用比色法,于500 nm处测定药材中以芦丁计总黄酮的含量,采用HPLC法测定总黄酮中金丝桃苷的含量,计算金丝桃苷的转移率。采用HPLC法建立赶山鞭总黄酮提取物的指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012年版)》进行相似度评价,确定共有峰,并采用SPSS22.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果 赶山鞭总黄酮的最佳提取条件为以65%乙醇,料液比1∶10,提取120min,提取2次。建立的赶山鞭药材总黄酮提取物的HPLC指纹图谱有15个共有指纹峰,指纹图谱的相似度分析结果显示相似度均大于0.61,表明10批样品的化学成分一致性较好,但各成分含量存在差异,对部分色谱峰进行了归属指认分别是金丝桃苷、槲皮素、芦丁、山柰酚。聚类分析可知欧氏距离为25时,10批样品可聚为2类,S1与S7为一类,其余聚为一类;欧氏距离为15时,可聚为5类,即S3、S5、S6、S8~S10聚为一类,S1、S2、S4、S7各为一类。经主成分分析,4个主成分因子的累积方差贡献率为88.659%,以S5样品的主成分因子综合得分最高。结论 响应面法优化的赶山鞭总黄酮提取纯化条件简单可靠,建立的HPLC指纹图谱能够简便、高效地反映赶山鞭总黄酮提取物中大部分化学成分信息,为赶山鞭药材的质量评价奠定基础。
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