【摘 要】
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目的:探究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的作用及其机制.方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,将其分为对照组、H/R组、PARP-1特异性抑制剂氨基苯甲酰胺(3-AB)处理组(3-AB组)、3-AB+过表达空载(3-AB+oe-NC)组和3-AB+过表达HMGB1(3-AB+oe-HMGB1)组.除对照组外,其他各组均予H/R处理.采用CCK-8法检测细胞活力,EdU实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫沉淀法检测HMGB1乙酰化,免疫荧光染色检测
【机 构】
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海南西部中心医院心血管内科,儋州 571799
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目的:探究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的作用及其机制.方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,将其分为对照组、H/R组、PARP-1特异性抑制剂氨基苯甲酰胺(3-AB)处理组(3-AB组)、3-AB+过表达空载(3-AB+oe-NC)组和3-AB+过表达HMGB1(3-AB+oe-HMGB1)组.除对照组外,其他各组均予H/R处理.采用CCK-8法检测细胞活力,EdU实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫沉淀法检测HMGB1乙酰化,免疫荧光染色检测细胞中HMGB1的表达,western blotting法检测细胞PARP-1、HMGB1、Beclin1、LC3和p62蛋白表达.结果:与对照组比较,H/R组H9c2细胞活力、EdU阳性细胞数、p62蛋白表达明显降低,细胞凋亡率和PARP-1、HMGB1、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显升高,HMGB1乙酰化水平升高(均P<0.05),胞核HMGB1蛋白转移至胞质.与H/R组比较,3-AB组H9c2细胞活力、EdU阳性细胞数、p62蛋白表达明显升高,细胞凋亡率和PARP-1、HMGB1、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达明显降低,HMGB1乙酰化水平降低(均P0.05).与3-AB+oe-NC组比较,3-AB+oe-HMGB1组H9c2细胞活力、EdU阳性细胞数、p62蛋白表达明显降低,细胞凋亡率和HMGB1、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达及HMGB1乙酰化水平明显升高(均P0.05).结论:抑制PARP-1通过抑制HMGB1乙酰化和核移位减轻H/R诱导的心肌细胞凋亡和自噬,促进细胞增殖.
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