目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSC)在体外模拟的急性肾损伤(AKI)微环境中的迁移特点,明确红细胞生成素(EPO)干预对BMSC迁移的影响,并探讨其可能机制.方法 肾小管上皮细胞(RTEC)于低氧-复氧(HR)环境中各培养12h获得HR-RETC,体外模拟AKI.采用Transwell体系将BMSC与RTEC共培养.实验分7组:对照组(①组单纯BMSC培养)、BMSC-RTEC共培养组(②组)、BMSC-HR-RTEC共培养+不同浓度EPO干预组(③组～⑦组,EPO浓度:0、1、5、10、50 IU/ml).共培养48 h后检测各组BMSC迁移数量,Western印迹法分别检测下室RTEC内的基质细胞衍生因子1(SDF-1)表达及上室BMSC的磷酸化(p)MAPK、MAPK水平,ELISA法检测RTEC培养上清中的SDF-1浓度.结果 BMSC向HR-RTEC培养室的迁移数量增加,EPO干预可放大此效应,以10 IU/ml时最强[与③组比较,(46.67±7.37)个/HP比(19.00±2.37)个/HP,P＜0.05].③组HR-RTEC的细胞内SDF-1表达水平(0.37±0.01比0.19±0.01,P＜0.05)及培养上清中SDF-1浓度[(61.64±4.88) μg/L比(35.26±8.78) μg/L,P＜0.05]均高于未处理RTEC(②组),EPO干预可进一步增加其水平,以10 IU/ml时最强[(⑥组与③组比较:(173.53±14.66) μg/L比(61.64±4.88) μg/L,P＜0.05],并伴有BMSC内MAPK磷酸化增强.结论 体外模拟的AKI微环境对BMSC有定向趋化作用,EPO干预可增强其趋化效果,其机制可能与SDF-1水平增加及SDF-1-CXCR4轴下游的信号蛋白MAPK的磷酸化有关。
红细胞生成素对急性肾损伤微环境下骨髓间充质干细胞定向趋化的影响
【摘 要】
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目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSC)在体外模拟的急性肾损伤(AKI)微环境中的迁移特点,明确红细胞生成素(EPO)干预对BMSC迁移的影响,并探讨其可能机制.方法 肾小管上皮细胞(RTEC)于低氧-复氧(HR)环境中各培养12h获得HR-RETC,体外模拟AKI.采用Transwell体系将BMSC与RTEC共培养.实验分7组:对照组(①组单纯BMSC培养)、BMSC-RTEC共培养组(②组)、
【机 构】
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200003上海,第二军医大学附属长征医院肾内科解放军肾脏病研究所,200003上海,第二军医大学附属长征医院肾内科解放军肾脏病研究所,解放军第四五五医院肾内科南京军区肾脏病研究所,解放军第四五五医院
【出 处】
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中华肾脏病杂志
【发表日期】
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2013年29期
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