【摘 要】
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目的构建针对Smad家族相关系列原核表达载体,观察其相应蛋白诱导表达纯化情况。方法 PCR扩增Smad2/3/4全长及截短片段,定向插入p GEX-6P-1载体中,构建原核表达重组质粒pGEX-6
【机 构】
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广东医科大学附属医院临床医学研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.81570062、No.8160009);广东省自然科学基金(No.2016A030313681);广东医科大学科研基金面上培育项目(No.M2015009);2017年度广东省医学科研基金项目(No.A2017010)
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目的构建针对Smad家族相关系列原核表达载体,观察其相应蛋白诱导表达纯化情况。方法 PCR扩增Smad2/3/4全长及截短片段,定向插入p GEX-6P-1载体中,构建原核表达重组质粒pGEX-6P-1-Smad2/3/4。经酶切和测序正确后,重组质粒转化表达菌株BL21（DE3）,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达;上清经GST-Sepharose4B亲和纯化,SDS-PAGE考马斯亮蓝染色鉴定。结果原核表达载体p GEX-6P-1-Smad2/3/4构建成功,SDS-PAGE证实Smad
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