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摘要[目的]探讨植物提取物对烤后烟品质特性的影响，为开发植物源提取物防治烟草普通花叶病毒病提供理论依据。[方法]采用大田直接喷施方法，测定并分析美洲商陆和绞股蓝的提取物对烤后烟常规化学成分、矿质元素及产质量等指标的影响。[结果]感病植株各品质指标显著降低，喷施2种植物提取物后，感病植株烤后烟各品质指标都得到不同程度的恢复，其效果大小顺序为复配制剂、商陆提取物、绞股蓝提取物，且高浓度效果优于低浓度。[结论]美洲商陆和绞股蓝提取物对正常烟株品质指标无不良影响，但能显著改善感病植株各品质指标，是防治烟草普通花叶病毒病较理想的植物源药剂。
关键词美洲商陆；绞股蓝；提取物；烟草花叶病毒；品质
中图分类号S572文献标识码
A文章编号0517-6611（2016）08-150-03
Abstract[Objective] The aim was to discuss effects of different plant source extracts on quality of fluecured tobacco and provide theoretical basis for controlling TMV.[Method] Field spraying was taken as experimental method， effects of pokeweed and gynostemma extracts on chemical components， mineral elements and yield and quality of fluecured tobacco were studied [Result] The quality indexes of infected TMV plant were declined， however， these quality indexes were alleviated by spraying plant source extracts.The effects showed mixture > pokeweed extracts> gynostemma extracts， and high concentration of extracts indicated better effects than low concentration.[Conclusion] The extracts of pokeweed and gynostemma have no negative effects on quality of normal fluecured tobacco， but can significantly improve qualities of infected TMV plants.Pokeweed and gynostemma could act as plant sources to exploit biogenic pesticides.
Key wordsPokeweed；Gynostemma；Extracts；Tobacco mosaic virus；Quality
烟草普通花叶病毒病是由病毒（TMV）引起的一种病害，在我国各烟区均有发生，是烟草主要的病毒病害[1]。烟株一旦被TMV侵染，便终生处在被病毒危害的状态，而被感染TMV的烟叶基本无利用价值[2-3]。在当前国内绿色生态防治病虫害的大环境下，植物源农药由于具备许多优点，应在烟草害虫防治方面扮演更重要的角色[4]。目前，研究者已对300多种植物进行了初步的筛选试验[5]，沈建国等[6]对78科162种植物进行了筛选，发现有160种植物提取物对TMV的侵染有一定的抑制作用。除了研究单个植物外，人们还对不同植物提取物复配制剂的抑制效果进行了对比试验，发现采用美洲商陆、甘草、连翘等植物提取物的复配制剂取得较好的防治效果，在大田大面积试验中防治TMV效果达71.02%～81.92%[7]。烟草是一种特殊的经济作物，从某种程度上讲对其品质的要求要大于产量。植物提取物虽然对TMV有较好的防治效果，但对烟草品质的影响尚鲜见报道。为此，笔者研究了美洲商陆、绞股蓝及其复配制剂对烟草品质指标的影响，以期为烟草普通花叶病毒病的绿色防治提供理论依据。
1材料与方法
1.1材料美洲商陆（Phytolacca americana Linn）：商陆科商陆的根系。绞股蓝（Gynostemma pentaphyllum）：葫芦科绞股蓝叶。植物样品放于烘箱中60 ℃烘干，粉碎后于85 ℃提取30 min后，滤出液体，再重复1次，2次液体混合备用。喷施时将混合液稀释2倍作为高浓度处理，稀释4倍作为低浓度处理。
1.2试验设计
共设7个处理：对照（CK）、美洲商陆提取物低浓度喷施（S1）、美洲商陆提取物高浓度喷施（S2）、绞股蓝低浓度喷施（
J1）、绞股蓝高浓度喷施（J2）、美洲商陆+绞股蓝低浓度喷施（M1）、美洲商陆+绞股蓝高浓度喷施（M2）。
试验于2015年3～11月进行，大田烟草试验田设在河南省泌阳县盘古乡。该田烟草TMV病害发生严重。在温室内漂浮育苗，待烟草幼苗长至4叶期时将其移栽至试验田。各项栽培管理措施均按常规进行。分别于移栽前、移栽后、团棵期和圆顶期进行叶面喷施，每处理重复3次，共21个小区，每小区面积为350 m2，采用随机区组试验设计。每个处理周围设置3行保护行。采用电动喷雾器对烟叶叶面喷雾，每次喷雾的药液量以正反叶面喷透而不下滴为准。
1.3取样与测定方法
烤后烟按部位取样，将上部叶、中部叶和下部叶等比例混合，对所取样品进行常规化学成分分析[8]。总糖的测定采用蒽酮比色法；还原糖的测定采用DNS显色法；淀粉的测定采用蒽酮比色法；总氮的测定采用凯氏定氮法；烟碱的测定采用紫外分光光度计法；石油醚提取物的测定采用索氏抽提法。烟叶矿质元素的测定采用干灰化法，使用ICPMPX光谱仪进行测定[9]。 1.4数据处理
试验数据采用Excel和DPS软件进行统计分析。
2结果与分析
2.1不同植物提取物对烤后烟常规化学成分的影响由表1可知，CK中感病烟株与正常烟株相比总糖、还原糖、还原糖/总糖、淀粉和石油醚提取物均显著降低，而总氮、烟碱和氮碱比均显著增加。商陆和绞股蓝提取物均缓解了感病烟株总糖、还原糖、还原糖/总糖、淀粉和石油醚提取物的降低，并缓解了总氮、烟碱和氮碱比的升高；各提取物效果大小顺序为复配制剂、商陆提取物、绞股蓝提取物，高浓度效果优于低浓度。对于正常烟株来说，商陆和绞股蓝提取物适当增加了烤后烟各常规指标的含量，但对石油醚提取物无显著影响。
2.2不同植物提取物对烤后烟矿质元素含量的影响
由表2可知，对于大、中量元素来说，CK中感病植株与正常烟株相比，P、K和Mg均显著降低，而Ca显著增加；商陆和绞股蓝提取物缓解了感病烟株P、K和Mg的降低，并改善了Ca的增加；对于各处理正常烟株来说，商陆和绞股蓝提取物对4种大、中量元素无显著影响。对于微量元素来说，CK中感病植株与正常烟株相比，B、Cu、Fe、Mn和Zn均呈显著降低趋势，而Na变化不明显；商陆和绞股蓝提取物缓解了感病烟株B、Cu、Fe、Mn和Zn的降低，对Na有微弱的增加作用；对于各处理正常烟株来说，商陆和绞股蓝提取物对B、Cu、Fe和Mn无显著作用，对Na和Zn有一定的增加作用。
2.3不同植物提取物对烤后烟产、质量的影响
由表3可知，2种植物提取物均能增加烤后烟的产量，并且能显著增加上等烟和上中等烟比例，其效果大小顺序为复配制剂、商陆提取物、绞股蓝提取物，高浓度效果优于低浓度。对于TMV暴发严重的烟田来说，商陆和绞股蓝提取物均对烤后烟产、质量有显著促进作用。
3结论与讨论
试验通过比较2种植物提取物及其复配制剂对感染TMV烤后烟常规化学成分、矿质元素和产、质量性状，表明感染TMV后烤烟各品质指标显著下降，可用性降低；而喷施植物提取物可显著改善感病烟株各品质指标，且对正常烟株无不良影响。这说明从植物中寻找抗病毒活性物质已经成为开发植物源农药的重要途径之一，与传统农药相比，植物源农药具有以下优点：有效成分为天然物质，施用后较易分解为无毒物质，对环境无污染；组分多元化，使病毒较难产生抗药性且对有益生物安全；可大量种植，并且开发成本较低[10-11]。因此，植物源农药是目前绿色生态防治研究开发的重点，也是我国植物源农药研究开发的方向。
植物提取物防治烟草病毒病是未来的一个重要研究方向，且许多试验都表明植物提取物对烟草病毒病有良好的抑制作用。研究发现，植物源有效活性物质抗植物病毒的作用主要表现在4个方面[12-13]：①直接作用于病毒，与病毒体外结合，降低了病毒粒子对寄主的识别能力而起钝化作用；②作用于寄主上病毒侵染的结合位点；③诱导植物产生抗性；④抑制病毒复制。关于植物提取物对感染TMV烟株品质指标的研究报道也较多，如白海群等[14]研究发现白花蛇草提取液可改善感染TMV烟株的品质；刘华山等[15]研究了毛叶子花提取液与感染TMV烟株品质之间的关系，发现该提取液可诱导烟株产生抗病性，并显著改善品质指标。今后还应对该2种植物中具体起作用的化学成分进行分析，同时深入分析其他品质指标，如中性致香物质、有机酸等对植物提取物的响应，为进一步开发绿色无公害、环境友好型植物源生物农药提供理论依据。
参考文献
[1]
蔡翼杨，杨天沛，黄清忠.浮盘消毒方式对烟叶TMV的影响分析[J].农学学报， 2015（5）：29-32.
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[3] WANG J，WANG X R，ZHOU Q， et al.iTRAQ protein profile analysis provides integrated insight into mechanisms of tolerance to TMV in tobacco （Nicotiana tabacum）[J].Journal of proteomics， 2016， 132（1）：21-30.
[4] 张兴，马志卿，冯俊涛.植物源农药研究进展[J].中国生物防治学报， 2015， 31（5）：685-698.
[5] 韩锦峰，王晓军，刘华山，等.植物提取物抑制烟草花叶病毒（TMV）的研究进展[J].河南农业科学，2012，41（3）：1-6.
[6] 沈建国，谢荔岩，吴祖建，等.药用植物提取物抗烟草花叶病毒活性的研究[J].中草药，2006，37（2）：259-261.
[7] 刘华山，白海群，韩锦峰，等.几种植物提取液对TMV体外活性及烟草叶片超微结构的影响[J].中国农业科学，2010，43（5）：957-964.
[8] 王瑞新.烟草化学[M].北京：中国农业出版社，2003.
[9] 鲍士旦.土壤农化分析[M].北京：中国农业出版社，2000.
[10] 陈丕庭，马树杰，殷培军.植物源抗病毒剂VFB1防治烟草花叶病毒病研究[J].中国烟草学报， 2015（3）：93-99.
[11] SERGEEVA V.Medicinal plants to control diseases and pests[J].Medicinal and aromatic plants of the world， 2015，1：257-271.
[12] HADIDI A，KHETARPAL R K，KONGANEZAWA H.Plant virus disease control[M].St.Paul， Minnesota：The American Phytopathological Society， 1998：154-162.
[13] FRENCH C J，TOWERS G H N.Inhibition of infectivity of potato virus X by flavonoids[J].Phytochemistry， 1992，31（9）：3017-3020.
[14] 白海群，刘子仪，崔德强.白花蛇草提取液对感染TMV烟株的生理效应及品质的影响[J].安徽农业科学，2010，38（27）：14994-14996.
[15] 刘华山，白海群，韩锦峰，等.毛叶子花提取液对感染TMV烟株的生理效应及品质的影响[J].贵州农业科学，2008，36（6）：17-19.
关键词美洲商陆；绞股蓝；提取物；烟草花叶病毒；品质
中图分类号S572文献标识码
A文章编号0517-6611（2016）08-150-03
Abstract[Objective] The aim was to discuss effects of different plant source extracts on quality of fluecured tobacco and provide theoretical basis for controlling TMV.[Method] Field spraying was taken as experimental method， effects of pokeweed and gynostemma extracts on chemical components， mineral elements and yield and quality of fluecured tobacco were studied [Result] The quality indexes of infected TMV plant were declined， however， these quality indexes were alleviated by spraying plant source extracts.The effects showed mixture > pokeweed extracts> gynostemma extracts， and high concentration of extracts indicated better effects than low concentration.[Conclusion] The extracts of pokeweed and gynostemma have no negative effects on quality of normal fluecured tobacco， but can significantly improve qualities of infected TMV plants.Pokeweed and gynostemma could act as plant sources to exploit biogenic pesticides.
Key wordsPokeweed；Gynostemma；Extracts；Tobacco mosaic virus；Quality
烟草普通花叶病毒病是由病毒（TMV）引起的一种病害，在我国各烟区均有发生，是烟草主要的病毒病害[1]。烟株一旦被TMV侵染，便终生处在被病毒危害的状态，而被感染TMV的烟叶基本无利用价值[2-3]。在当前国内绿色生态防治病虫害的大环境下，植物源农药由于具备许多优点，应在烟草害虫防治方面扮演更重要的角色[4]。目前，研究者已对300多种植物进行了初步的筛选试验[5]，沈建国等[6]对78科162种植物进行了筛选，发现有160种植物提取物对TMV的侵染有一定的抑制作用。除了研究单个植物外，人们还对不同植物提取物复配制剂的抑制效果进行了对比试验，发现采用美洲商陆、甘草、连翘等植物提取物的复配制剂取得较好的防治效果，在大田大面积试验中防治TMV效果达71.02%～81.92%[7]。烟草是一种特殊的经济作物，从某种程度上讲对其品质的要求要大于产量。植物提取物虽然对TMV有较好的防治效果，但对烟草品质的影响尚鲜见报道。为此，笔者研究了美洲商陆、绞股蓝及其复配制剂对烟草品质指标的影响，以期为烟草普通花叶病毒病的绿色防治提供理论依据。
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1.1材料美洲商陆（Phytolacca americana Linn）：商陆科商陆的根系。绞股蓝（Gynostemma pentaphyllum）：葫芦科绞股蓝叶。植物样品放于烘箱中60 ℃烘干，粉碎后于85 ℃提取30 min后，滤出液体，再重复1次，2次液体混合备用。喷施时将混合液稀释2倍作为高浓度处理，稀释4倍作为低浓度处理。
1.2试验设计
共设7个处理：对照（CK）、美洲商陆提取物低浓度喷施（S1）、美洲商陆提取物高浓度喷施（S2）、绞股蓝低浓度喷施（
J1）、绞股蓝高浓度喷施（J2）、美洲商陆+绞股蓝低浓度喷施（M1）、美洲商陆+绞股蓝高浓度喷施（M2）。
试验于2015年3～11月进行，大田烟草试验田设在河南省泌阳县盘古乡。该田烟草TMV病害发生严重。在温室内漂浮育苗，待烟草幼苗长至4叶期时将其移栽至试验田。各项栽培管理措施均按常规进行。分别于移栽前、移栽后、团棵期和圆顶期进行叶面喷施，每处理重复3次，共21个小区，每小区面积为350 m2，采用随机区组试验设计。每个处理周围设置3行保护行。采用电动喷雾器对烟叶叶面喷雾，每次喷雾的药液量以正反叶面喷透而不下滴为准。
1.3取样与测定方法
烤后烟按部位取样，将上部叶、中部叶和下部叶等比例混合，对所取样品进行常规化学成分分析[8]。总糖的测定采用蒽酮比色法；还原糖的测定采用DNS显色法；淀粉的测定采用蒽酮比色法；总氮的测定采用凯氏定氮法；烟碱的测定采用紫外分光光度计法；石油醚提取物的测定采用索氏抽提法。烟叶矿质元素的测定采用干灰化法，使用ICPMPX光谱仪进行测定[9]。 1.4数据处理
试验数据采用Excel和DPS软件进行统计分析。
2结果与分析
2.1不同植物提取物对烤后烟常规化学成分的影响由表1可知，CK中感病烟株与正常烟株相比总糖、还原糖、还原糖/总糖、淀粉和石油醚提取物均显著降低，而总氮、烟碱和氮碱比均显著增加。商陆和绞股蓝提取物均缓解了感病烟株总糖、还原糖、还原糖/总糖、淀粉和石油醚提取物的降低，并缓解了总氮、烟碱和氮碱比的升高；各提取物效果大小顺序为复配制剂、商陆提取物、绞股蓝提取物，高浓度效果优于低浓度。对于正常烟株来说，商陆和绞股蓝提取物适当增加了烤后烟各常规指标的含量，但对石油醚提取物无显著影响。
2.2不同植物提取物对烤后烟矿质元素含量的影响
由表2可知，对于大、中量元素来说，CK中感病植株与正常烟株相比，P、K和Mg均显著降低，而Ca显著增加；商陆和绞股蓝提取物缓解了感病烟株P、K和Mg的降低，并改善了Ca的增加；对于各处理正常烟株来说，商陆和绞股蓝提取物对4种大、中量元素无显著影响。对于微量元素来说，CK中感病植株与正常烟株相比，B、Cu、Fe、Mn和Zn均呈显著降低趋势，而Na变化不明显；商陆和绞股蓝提取物缓解了感病烟株B、Cu、Fe、Mn和Zn的降低，对Na有微弱的增加作用；对于各处理正常烟株来说，商陆和绞股蓝提取物对B、Cu、Fe和Mn无显著作用，对Na和Zn有一定的增加作用。
2.3不同植物提取物对烤后烟产、质量的影响
由表3可知，2种植物提取物均能增加烤后烟的产量，并且能显著增加上等烟和上中等烟比例，其效果大小顺序为复配制剂、商陆提取物、绞股蓝提取物，高浓度效果优于低浓度。对于TMV暴发严重的烟田来说，商陆和绞股蓝提取物均对烤后烟产、质量有显著促进作用。
3结论与讨论
试验通过比较2种植物提取物及其复配制剂对感染TMV烤后烟常规化学成分、矿质元素和产、质量性状，表明感染TMV后烤烟各品质指标显著下降，可用性降低；而喷施植物提取物可显著改善感病烟株各品质指标，且对正常烟株无不良影响。这说明从植物中寻找抗病毒活性物质已经成为开发植物源农药的重要途径之一，与传统农药相比，植物源农药具有以下优点：有效成分为天然物质，施用后较易分解为无毒物质，对环境无污染；组分多元化，使病毒较难产生抗药性且对有益生物安全；可大量种植，并且开发成本较低[10-11]。因此，植物源农药是目前绿色生态防治研究开发的重点，也是我国植物源农药研究开发的方向。
植物提取物防治烟草病毒病是未来的一个重要研究方向，且许多试验都表明植物提取物对烟草病毒病有良好的抑制作用。研究发现，植物源有效活性物质抗植物病毒的作用主要表现在4个方面[12-13]：①直接作用于病毒，与病毒体外结合，降低了病毒粒子对寄主的识别能力而起钝化作用；②作用于寄主上病毒侵染的结合位点；③诱导植物产生抗性；④抑制病毒复制。关于植物提取物对感染TMV烟株品质指标的研究报道也较多，如白海群等[14]研究发现白花蛇草提取液可改善感染TMV烟株的品质；刘华山等[15]研究了毛叶子花提取液与感染TMV烟株品质之间的关系，发现该提取液可诱导烟株产生抗病性，并显著改善品质指标。今后还应对该2种植物中具体起作用的化学成分进行分析，同时深入分析其他品质指标，如中性致香物质、有机酸等对植物提取物的响应，为进一步开发绿色无公害、环境友好型植物源生物农药提供理论依据。
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[15] 刘华山，白海群，韩锦峰，等.毛叶子花提取液对感染TMV烟株的生理效应及品质的影响[J].贵州农业科学，2008，36（6）：17-19.