【摘 要】
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以含C型产气荚膜梭菌分离株（CP2）肠毒素基因的克隆载体pMD18-T-cpe为材料，根据产气荚膜梭菌开放阅读框设计合成一对特异性引物，采用PCR技术对其进行扩增，经BamHI和EcoRI双酶切后，从
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州大学职业技术学院,贵州大学动物疫病研究所
【基金项目】
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国家科技部支撑计划[2007BAD53B03];贵州省科技支撑计划项目[黔科合NY字(2009)3042];贵州省农业厅兽医科技计划项目(2008-06)
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以含C型产气荚膜梭菌分离株（CP2）肠毒素基因的克隆载体pMD18-T-cpe为材料，根据产气荚膜梭菌开放阅读框设计合成一对特异性引物，采用PCR技术对其进行扩增，经BamHI和EcoRI双酶切后，从胶上回收目的基因，与经过相同两种内切酶处理的原核表达载体pET32a连接，转化大肠杆菌DHSa感受态细胞后，提取质粒进行PCR和BnmHI／E00RI双酶切鉴定后测序。结果表明，肠毒素基因已成功地克隆到原核表达载体上（重组质粒命名为pET32a-cpe），从而构建了产气荚膜梭菌肠毒素基因的原核表达质粒。
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