【摘 要】
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目的 探讨聚合酶链反应 (PCR)扩增SEN病毒 (SENV)核酸的优化条件。方法 将标本分别以AcupureDNA/RNA提取法(方法 1)、SDS 蛋白酶K方法 (方法 2 )及裂解液提取TTV核酸法(方
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科; 华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科 430030武汉; 430030武汉; 430030武汉;
【基金项目】
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湖北省科委资助项目(2002AA301C32)
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目的 探讨聚合酶链反应 (PCR)扩增SEN病毒 (SENV)核酸的优化条件。方法 将标本分别以AcupureDNA/RNA提取法(方法 1)、SDS 蛋白酶K方法 (方法 2 )及裂解液提取TTV核酸法(方法 3)抽提SENVDNA模板,并用 3组针对SENVDNA不同区的引物进行扩增,比较不同模板提取方法、不同扩增引物及不同体积标本对SENVDNA检出率的影响。结果 在 191份血清中,方法 1、方法 2和方法 3提取核酸后可分别检测出 15份、9份和 7份。采用方法 1提取SENVDNA的基础上,采用 2组套式引物分别扩增出 15份和 11份,一次PCR引物仅检出 2份SENVDNA阳性标本;应用引物 2扩增至少需要 50μl血清。结论 不同引物扩增方法和不同模板提取方法可能是影响SENVDNA检出率重要因素。
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