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摘 要：本文采用支撑液膜法制备头孢氨苄并对其含量进行测定。测定方法：色谱柱为安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），水-甲醇-3.85%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相，流速1.0mL·min-1；柱温：35℃；检测波长为254nm。此测定方法准确、重现性好；该工艺路线操作简便，成本低，适合工业生产。
关键词：支撑液膜法；制备；研究
头孢氨苄中文别名为苯甘头孢霉素、先锋霉素Ⅳ、头孢菌素Ⅳ等，化学名（6R，7R）-3-甲基-7-（（R）-2-氨基-2-苯乙酰氨基）-8-氧-5-硫杂-1-双环（4.2.0）辛-2-烯-2-甲酸。头孢氨苄能抑制细胞壁的合成，使细胞内容物膨胀至破裂溶解，杀死细菌[1-3]。头孢氨苄为广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用，其杀菌能力比青霉素类大20倍，比磺胺类大10倍、比喹诺酮类大5倍。头孢氨苄主用于革兰氏阳性菌和阴性菌感染的流行性感冒、猪丹毒、炭疽、气肿疽、恶性水肿、放线菌病、传染性胸膜肺炎、肺疫肺炎、口腔炎、尿道炎等。支撑液膜是将液膜牢固地吸附在多孔支撑体的微孔之中，在膜的两侧是与膜互不相溶的料液相和反萃相。本实验采用支撑液膜法对头孢氨苄的制备进行研究。
1 仪器与试剂
1.1 仪器：LM-C2000超声波清洗器（武汉朗玛恒瑞科技有限公司）；VERTEX VI500高效液相色谱仪（上海禾工科学仪器有限公司）；ABS 220-4分析天平（北京普析通用仪器有限责任公司）；Kertone实验室超纯水机（科尔顿（中国）有限公司）；TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京东西分析仪器有限公司）；Phenomenex 通用型保护柱（广州菲罗门科学仪器有限公司）； W202型电热恒温干燥箱（赛默飞世尔科技（中国）有现公司）；DZF-2真空干燥箱（天津市瑞普电子仪器公司）；SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；JULABO实验室温度控制器（西安中诺仪器有限公司）；DC-0506W旋转粘度计专用低温恒温槽（上海衡平仪器仪表厂）。
1.2 色谱柱：安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。
1.3 试药：乙腈（连云港市新浦區海宁化学厂）、甲醇（河北东光恒达化工有限责任公司）、磷酸二氢铵（北京市崇文化学试剂公司）、醋酸钠（济南东润精化科技有限公司）、醋酸（天津市康科德科技有限公司）、2-萘酚（北京市崇文化学试剂公司）、碳酸钠（天台县恒丰化工有限公司）、磷酸一氢钠（北京市崇文化学试剂公司）、氯化钾（济南鑫顺化工有限公司）、甲基三辛基氯化铵（海城市桑格化学有限公司）、1-癸醇（济南宏源化工有限公司）。
2 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[4-13]。色谱柱为安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），水-甲醇-3.85%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相，流速1.0mL·min-1；柱温：35℃；检测波长为254nm。理论板数按头孢氨苄计算应不得低于2000。
3 液膜法
液膜分离法是一种以具有选择透过性的液态膜为分离介质，以浓度差为推动力的液体混合物的膜分离操作。液膜由稳定剂（稳定剂可以提高膜相液的粘度，促进液膜的稳定性）、表面活性剂（显著改变液体表面张力或相互间界面张力）、膜溶剂（膜溶剂是形成液膜的基体物质）、流动载体（相当于萃取剂）组成。液膜法常用于金属离子的浓缩、提纯和分离；离废水中的有机、无机酸；稀土离子的分离富集；含酚废水的处理；手性物质分离；气体分离等。
4 实验
4.1 ph对头孢氨苄分配系数的影响
配制头孢氨苄浓度为30毫摩尔/升的进料相，调节进料相pH分别为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0，取体积相同的进料相和含有质量分数为百分之六的甲基三辛基氯化铵和质量分数为3.0%1一癸醇的有机相混合，磁力搅拌四小时，静置后测其分配系数。试验结果表明PH值为9时分配系数，所以选择PH值为9。
4.2 进料相与有机相体积比对萃取效果的影响。
配制头孢氨苄浓度为30毫摩尔/升的进料相，调节进料相pH分别为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0，取体积相同的进料相和含有质量分数为百分之六的甲基三辛基氯化铵和质量分数为3.0%1-癸醇。实验考察有机相和进料相体积比分别为3：1、2：1、1：1、1：2、 1：3时的萃取平衡。实验结果表明，有机相和进料相体积比为1：1时效果最好，所以选择有机相和进料相体积比为1：1。
4.3 载体选择性实验
分别配制浓度为30毫摩尔/升的头孢氨苄、7-ADCA、丙二醇单甲醚溶液为进料相， 调节p H为9.0。与等百分之六的甲基三辛基氯化铵和质量分数为3.0%1-癸醇的有机相混合，磁力搅拌四小时，测各溶液分配系数。实验结果表明头孢氨苄、7-ADCA、丙二醇单甲醚溶液都可与载体甲基三辛基氯化铵结合，但丙二醇单甲醚效果最好。
4.4 反萃反应
取与30毫摩尔/升的头孢氨苄溶液进行过萃取实验后的有机相，分别与7-ADCA溶液、丙二醇单甲醚溶液、KCL溶液的混合液进行反萃实验。实验结果表明KCL的反萃能力越强，但底物利用率低所以选择底物利用率高的丙二醇单甲醚。
结束语
当进料液浓度为30毫摩尔/升，PH为9.0，有机相与进料相体积比为1：1时， 头孢氨苄的萃取率为百分之八十三。用丙二醇单甲醚溶液作为反萃相，底物利用率提高了百分之四十。
参考文献
[1]张健，王长远，刘琦，郭鑫金，苍健，孟强，Taiichi Kaku，刘克辛.JBP485与头孢氨苄相互作用的药动学研究[A].中国药理学会第十次全国学术会议专刊[C].2009.
[2]李琴，刘皋林.药物相互作用对免疫抑制剂合理用药的影响[A].2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C]，2010.
[3]张健，王长远，刘琦，郭鑫金，苍健，孟强，Taiichi Kaku，刘克辛.JBP485与头孢氨苄相互作用的药动学研究[A].第九届全国药物和化学异物代谢学术会议论文集[C].2009.
[4]夏登宁，夏艳姣，尹佳，贺英菊.HPLC同时测定血浆中头孢氨苄和甲氧苄啶的浓度[J].中国抗生素杂志，2008，11.
[5]杨家爱，吴晖，钱斌，张峻.HPLC法测定注射用头孢拉定中L-精氨酸的含量[J].中国药房，2008，01.
[6]周静安.高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊含量[J].中国医院药学杂志，1999，03.
[7]王晓丹，朱光宇.头孢氨苄甲氧苄啶颗粒含量测定方法研究[J].黑龙江科技信息，2009，33.
[8]赵军，朱晨，韩玲.反相高效液相色谱法同时分离和测定多种头孢菌素[J].山东大学学报（理学版），2006，04.
[9]陈叶平，许红叶.HPLC法测定头孢氨苄甲氧苄啶颗粒含量的方法改进[J].中国实用医药，2009，30.
[10]周静安.衢州324002；HPLC法测定头孢氨苄胶囊含量[J].中国现代应用药学，1999，05.
[11]祖凤梅.RP-HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度[J].中国医药导报，2008，04.
[12]丁少杰，郭亚红，滕一万，金凯洪，樊文玲，李磊，吴有庭.离子液体支撑液膜用于有机物分离的研究进展[J].膜科学与技术，2010（06）.
[13]薛冠，胡小玲，赵亚梅，郑熙.离子液体在支撑液膜中的应用[J].现代化工，2008（08）.
关键词：支撑液膜法；制备；研究
头孢氨苄中文别名为苯甘头孢霉素、先锋霉素Ⅳ、头孢菌素Ⅳ等，化学名（6R，7R）-3-甲基-7-（（R）-2-氨基-2-苯乙酰氨基）-8-氧-5-硫杂-1-双环（4.2.0）辛-2-烯-2-甲酸。头孢氨苄能抑制细胞壁的合成，使细胞内容物膨胀至破裂溶解，杀死细菌[1-3]。头孢氨苄为广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用，其杀菌能力比青霉素类大20倍，比磺胺类大10倍、比喹诺酮类大5倍。头孢氨苄主用于革兰氏阳性菌和阴性菌感染的流行性感冒、猪丹毒、炭疽、气肿疽、恶性水肿、放线菌病、传染性胸膜肺炎、肺疫肺炎、口腔炎、尿道炎等。支撑液膜是将液膜牢固地吸附在多孔支撑体的微孔之中，在膜的两侧是与膜互不相溶的料液相和反萃相。本实验采用支撑液膜法对头孢氨苄的制备进行研究。
1 仪器与试剂
1.1 仪器：LM-C2000超声波清洗器（武汉朗玛恒瑞科技有限公司）；VERTEX VI500高效液相色谱仪（上海禾工科学仪器有限公司）；ABS 220-4分析天平（北京普析通用仪器有限责任公司）；Kertone实验室超纯水机（科尔顿（中国）有限公司）；TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京东西分析仪器有限公司）；Phenomenex 通用型保护柱（广州菲罗门科学仪器有限公司）； W202型电热恒温干燥箱（赛默飞世尔科技（中国）有现公司）；DZF-2真空干燥箱（天津市瑞普电子仪器公司）；SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；JULABO实验室温度控制器（西安中诺仪器有限公司）；DC-0506W旋转粘度计专用低温恒温槽（上海衡平仪器仪表厂）。
1.2 色谱柱：安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。
1.3 试药：乙腈（连云港市新浦區海宁化学厂）、甲醇（河北东光恒达化工有限责任公司）、磷酸二氢铵（北京市崇文化学试剂公司）、醋酸钠（济南东润精化科技有限公司）、醋酸（天津市康科德科技有限公司）、2-萘酚（北京市崇文化学试剂公司）、碳酸钠（天台县恒丰化工有限公司）、磷酸一氢钠（北京市崇文化学试剂公司）、氯化钾（济南鑫顺化工有限公司）、甲基三辛基氯化铵（海城市桑格化学有限公司）、1-癸醇（济南宏源化工有限公司）。
2 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[4-13]。色谱柱为安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），水-甲醇-3.85%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相，流速1.0mL·min-1；柱温：35℃；检测波长为254nm。理论板数按头孢氨苄计算应不得低于2000。
3 液膜法
液膜分离法是一种以具有选择透过性的液态膜为分离介质，以浓度差为推动力的液体混合物的膜分离操作。液膜由稳定剂（稳定剂可以提高膜相液的粘度，促进液膜的稳定性）、表面活性剂（显著改变液体表面张力或相互间界面张力）、膜溶剂（膜溶剂是形成液膜的基体物质）、流动载体（相当于萃取剂）组成。液膜法常用于金属离子的浓缩、提纯和分离；离废水中的有机、无机酸；稀土离子的分离富集；含酚废水的处理；手性物质分离；气体分离等。
4 实验
4.1 ph对头孢氨苄分配系数的影响
配制头孢氨苄浓度为30毫摩尔/升的进料相，调节进料相pH分别为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0，取体积相同的进料相和含有质量分数为百分之六的甲基三辛基氯化铵和质量分数为3.0%1一癸醇的有机相混合，磁力搅拌四小时，静置后测其分配系数。试验结果表明PH值为9时分配系数，所以选择PH值为9。
4.2 进料相与有机相体积比对萃取效果的影响。
配制头孢氨苄浓度为30毫摩尔/升的进料相，调节进料相pH分别为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0，取体积相同的进料相和含有质量分数为百分之六的甲基三辛基氯化铵和质量分数为3.0%1-癸醇。实验考察有机相和进料相体积比分别为3：1、2：1、1：1、1：2、 1：3时的萃取平衡。实验结果表明，有机相和进料相体积比为1：1时效果最好，所以选择有机相和进料相体积比为1：1。
4.3 载体选择性实验
分别配制浓度为30毫摩尔/升的头孢氨苄、7-ADCA、丙二醇单甲醚溶液为进料相， 调节p H为9.0。与等百分之六的甲基三辛基氯化铵和质量分数为3.0%1-癸醇的有机相混合，磁力搅拌四小时，测各溶液分配系数。实验结果表明头孢氨苄、7-ADCA、丙二醇单甲醚溶液都可与载体甲基三辛基氯化铵结合，但丙二醇单甲醚效果最好。
4.4 反萃反应
取与30毫摩尔/升的头孢氨苄溶液进行过萃取实验后的有机相，分别与7-ADCA溶液、丙二醇单甲醚溶液、KCL溶液的混合液进行反萃实验。实验结果表明KCL的反萃能力越强，但底物利用率低所以选择底物利用率高的丙二醇单甲醚。
结束语
当进料液浓度为30毫摩尔/升，PH为9.0，有机相与进料相体积比为1：1时， 头孢氨苄的萃取率为百分之八十三。用丙二醇单甲醚溶液作为反萃相，底物利用率提高了百分之四十。
参考文献
[1]张健，王长远，刘琦，郭鑫金，苍健，孟强，Taiichi Kaku，刘克辛.JBP485与头孢氨苄相互作用的药动学研究[A].中国药理学会第十次全国学术会议专刊[C].2009.
[2]李琴，刘皋林.药物相互作用对免疫抑制剂合理用药的影响[A].2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C]，2010.
[3]张健，王长远，刘琦，郭鑫金，苍健，孟强，Taiichi Kaku，刘克辛.JBP485与头孢氨苄相互作用的药动学研究[A].第九届全国药物和化学异物代谢学术会议论文集[C].2009.
[4]夏登宁，夏艳姣，尹佳，贺英菊.HPLC同时测定血浆中头孢氨苄和甲氧苄啶的浓度[J].中国抗生素杂志，2008，11.
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[6]周静安.高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊含量[J].中国医院药学杂志，1999，03.
[7]王晓丹，朱光宇.头孢氨苄甲氧苄啶颗粒含量测定方法研究[J].黑龙江科技信息，2009，33.
[8]赵军，朱晨，韩玲.反相高效液相色谱法同时分离和测定多种头孢菌素[J].山东大学学报（理学版），2006，04.
[9]陈叶平，许红叶.HPLC法测定头孢氨苄甲氧苄啶颗粒含量的方法改进[J].中国实用医药，2009，30.
[10]周静安.衢州324002；HPLC法测定头孢氨苄胶囊含量[J].中国现代应用药学，1999，05.
[11]祖凤梅.RP-HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度[J].中国医药导报，2008，04.
[12]丁少杰，郭亚红，滕一万，金凯洪，樊文玲，李磊，吴有庭.离子液体支撑液膜用于有机物分离的研究进展[J].膜科学与技术，2010（06）.
[13]薛冠，胡小玲，赵亚梅，郑熙.离子液体在支撑液膜中的应用[J].现代化工，2008（08）.