探讨自身抗原基因疫苗胰岛素瘤相关蛋白-2(pIA-2)以及分子免疫佐剂白细胞介素-4/单核细胞趋化因子-1(pIL-4/MCP-1)对糖尿病前期NOD小鼠发生自身免疫性糖尿病的预防作用。
方法利用分子克隆技术构建pIA-2自身抗原基因疫苗，将4～5周龄NOD小鼠分为pIA-2治疗组(n＝5)、pIL-4/MCP-1治疗组(n＝5)、联合治疗组(n＝5)及对照组(n＝5)，分别注射pIA-2、pIL-4/MCP-1、pIA-2联合pIL-4/MCP-1、增强型绿色荧光蛋白(pEGFP)，免疫结束后观察24周，比较各组糖尿病发病情况和胰岛炎的程度，并用RT-PCR方法和免疫组化法检测质粒在注射部位和胰岛的表达。两样本间均数的比较用t检验，率的比较用χ2检验进行统计。
结果单用pIA2或pIL-4/MCP-1治疗的NOD小鼠发病与对照组相比无显著改善；联合应用该两种质粒的NOD小鼠在观察期内未发病。RT-PCR检测结果显示免疫结束后2周，注射部位肌细胞中均有胰岛细胞瘤相关抗原2(IA-2)及白细胞介素-4(IL-4)表达。免疫组化法发现，免疫结束后2周，pIA-2注射组小鼠胰岛的IA-2表达量增加；IL-4在胰岛上可见少量表达。免疫结束后观察24周，检测各组的胰岛炎发生率，对照组、pIA2组、pIL-4/MCP-1组、pIA2＋pIL-4/MCP-1组中无胰岛炎的发生率分别为4.2% (1/24)、5% (1/20)、0(0.0)、62.5% (15/24)，外周性胰岛炎发生率分别为12.5%(3/24)、10% (2/20)、5% (1/20)、29% (7/24)，中心性胰岛炎发生率(<50%、>50%)分别为[50%(12/24), 33.3%(8/24)]、[40%(8/20)，45%(9/20)]、[45% (9/20)，50% (10/20)]、[4.2% (1/24)，4.2% (1/24)]。和对照组相比，联合治疗组中不发生胰岛炎的比率显著升高(χ2＝18.38，P<0.01)，发生中心性胰岛炎的比率显著降低(χ2＝11.68，P<0.001)，其余各组和对照组相比胰岛炎的发生比率无显著差异。以免疫组化法检测NOD小鼠胰岛内IA-2、IL-4的表达，显示免疫注射组IA-2、IL-4表达较对照组增强。
结论联合应用pIA-2及pIL-4/MCP-1基因疫苗提前免疫胰岛炎前期的NOD小鼠可抑制和延缓糖尿病的发生。