【摘 要】
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TALEN是一种常用的细胞基因组修饰工具.然而,目前TALEN技术介导的基因敲入效率较低,对提高TALEN介导基因敲入效率的方法进行了摸索.通过在Donor质粒引入I-SceI酶切位点,并将D
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TALEN是一种常用的细胞基因组修饰工具.然而,目前TALEN技术介导的基因敲入效率较低,对提高TALEN介导基因敲入效率的方法进行了摸索.通过在Donor质粒引入I-SceI酶切位点,并将Donor质粒、表达I-SceI的质粒及TALEN质粒对共转染,引发Donor质粒细胞内线性化.在以基因PC为靶位点时,经I-SceI胞内线性化的donor质粒基因成功定点插入的效率比不经过I-SceI胞内线性化的质粒提高300％.在另一个基因BSG的TALEN基因敲入系统中,这一效率提高200％.结果表明,I-Sce
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