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目的
筛选并鉴定神经母细胞瘤体外模型中血清差异表达的蛋白质细胞色素C,并推测其来源于非肿瘤细胞的凋亡。
方法将人神经母细胞瘤KP-N-NS细胞株细胞(106)种植于裸鼠皮下组织,4周后收集肿瘤组(14只)和对照组(25只)裸鼠血清,应用表面增强激光解吸/离子化-飞行时间质谱(SELDI-TOF)筛选两组血清间差异蛋白质,用高效液相色谱(HPLC)对血清蛋白进行分离、纯化,经LC-MS/MS(LTQ)对分离后的蛋白质进行肽指纹图谱(PMF)分析。
结果SELDI-TOF筛选出质荷比为11 609的蛋白质在肿瘤组及对照组的相对表达强度分别为3338.4±1410.9、59.8±40.7,肿瘤组蛋白表达量为对照组的55.8倍, LTQ确定肿瘤组血清中高表达的蛋白质为质荷比为11 606.2的小鼠源细胞色素C(非人类细胞色素C)。
结论细胞色素C在肿瘤组裸鼠血清中高表达,且肿瘤组裸鼠血清中的细胞色素C浓度的增高,源于机体内非肿瘤细胞的凋亡。