【摘 要】
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建立一种高效安全的基因定点编辑体系,为研究植物的光合作用途径以及生理代谢过程提供理想材料。针对拟南芥靶基因ALB3设计2个sgRNA,引导Cas9蛋白识别PAM位点,从而实现ALB3基
【机 构】
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喀什大学生命与地理科学学院,新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室,广东石油化工学院生物与食品工程学院
【基金项目】
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广东省攀登计划项目(pdjhb0343;pdjh2019b0323);国家自然科学基金项目(31470677);广东省自然科学基金项目(2019A1515010709;2017A030307017);广东科技计划项目(2017A030303087);大学生创新项目及培育计划项目(733163;733164;733301;733317);自治区研究生科研创新项目(XJ2019G290);广东省高
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建立一种高效安全的基因定点编辑体系,为研究植物的光合作用途径以及生理代谢过程提供理想材料。针对拟南芥靶基因ALB3设计2个sgRNA,引导Cas9蛋白识别PAM位点,从而实现ALB3基因的大片段敲除;将荧光筛选标记基因mCherry组装到CRISPR/Cas9载体中,构建一种带有荧光筛选标记的CRISPR/Cas9载体;利用农杆菌转化法转化拟南芥,对其后代进行筛选验证,在倒置荧光显微镜下挑选便可获得Cas9-Free的纯合突变种子。测序结果表明,含有可视化筛选标记基因的拟南芥ALB3基因编辑载体序列与预期
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