【摘 要】
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目的 阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌.方法 以安普霉素生物合成基因apr为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒pXJ40
【基金项目】
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国家自然科学基金（No.31070093）：国家“重大新药创制”科技重大专项（No.2012ZX09201101-008）
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目的 阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌.方法 以安普霉素生物合成基因apr为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒pXJ401,利用接合转移技术将其导入黑暗链霉菌Tt-49,获得工程菌TX302,并在此基础上敲除氨甲酰基转移酶基因tobZ,获得工程菌TX308.采用MS法,检测工程菌次级代谢产物的变化.结果 TX302主产氨甲酰妥布霉素,未检测到安普霉素.TX308不再合成氨甲酰妥布霉素,产物只检测到妥布霉素.结论 磷酸变位酶基因apr是安普霉素生物合成的
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