水稻HL-CMS中线粒体基因orf216原核表达载体构建及蛋白纯化

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将orf216基因克隆到含有组氨酸标签的原核表达载体pET-30a(+)中,得到重组质粒pET-30a(+)-orf216,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)plys菌株感受态细胞,经IVrG诱导后,SDS—PAGE和WesternBlot检测分析表达产物。通过Ni—NTA亲和层析系统纯化获得高纯度目的蛋白。研究结果表明,成功构建了pET-30a(+)-orf216原核表达载体并转化大肠杆菌。SDS—PAGE和Western Blot结果显示30ku处有单一条带,确定其能高效表达并且诱导表达产物为ORF2
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