血管生成抑制因子K4K5 cDNA基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Aiming

【摘要】

：

应用PCR方法,扩增人纤溶酶原cDNA基因中K4K5 cDNA片段,与酵母表达载体pPIC9K重组,获得表达质粒p9kkk-18.该质粒转化毕赤酵母菌GS115,用G418-YPD筛选高拷贝表型,PCR筛选K4K5 c

【作者】

：

官孝群王跃祥吴良成宋后燕

【机构】

：

复旦大学医学院基础医学院分子遗传学研究室,复旦大学医学院附属眼耳鼻喉科医院眼科

【出处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

2001年2期

【关键词】

：

K4K5cDNA 克隆表达毕赤酵母新生血管生成血管生成抑制因子 K4K5 cDNA cloning and expression %Pichi

【基金项目】

：

上海医科大学校科研和教改项目

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

应用PCR方法,扩增人纤溶酶原cDNA基因中K4K5 cDNA片段,与酵母表达载体pPIC9K重组,获得表达质粒p9kkk-18.该质粒转化毕赤酵母菌GS115,用G418-YPD筛选高拷贝表型,PCR筛选K4K5 cDNA与酵母染色体整合形成的阳性克隆,阳性克隆用甲醇诱导表达.表达产物r-K4K5分子量约21.5kD,占分泌总蛋白80%以上,产物浓度为150～250mg/L.初步纯化产物抑制牛毛细血管内皮(BCE)细胞增殖与鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管生成.

其他文献

超抗原SEA与抗黑色素瘤ScFv融合基因的构建及表达

采用酶切连接和重叠PCR连接两种方法将抗黑色素瘤单链抗体基因和去除N端信号肽的金黄色葡萄球菌肠毒素A基因进行融合,并将融合基因克隆于pET28-a表达载体上,转化大肠杆菌BL21

期刊

抗黑色素瘤单链抗体金黄色葡萄球菌肠毒素A融合蛋白靶向治疗基因表达antimelanoma single chain antibody staphyl

抗内毒素治疗的新策略

脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是G-菌造成的败血症或脓毒性休克病理中最重要的致病因素,若在整个病理过程的上游,即在细菌内毒素水平阻断脓毒性休克的发生,就可能限制或阻

期刊

细菌内毒素LPS结合蛋白抗内毒素治疗败血症脓毒性休克G-endotoxin LPS|binding proteins antiendoto

Smad3基因剔除致骨关节炎小鼠血清蛋白质组双向凝胶电泳分析

Smad3基因剔除导致小鼠骨关节炎.为了进一步深入研究Smad3基因缺失导致骨关节炎形成的分子机制,寻找骨关节炎发生早期的分子变化.用双向电泳技术结合肽质量指纹谱技术对Smad3

期刊

Smad3基因剔除骨关节炎小鼠血清蛋白质组双向凝胶电泳分析Smad3 2-DE PMF osteoarthritis

血管生成抑制因子K4K5 cDNA基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

其他学术论文