土壤中异化型硝酸还原酶是一种在厌氧条件下催化NO₃^-还原成NO₂^-的酶。本文报道了土壤中这种酶的检测及测定此酶活性的简便、灵敏、准确方法。此法为在淹水条件下,将土壤2.4-D（DNP）和KNO₃于25℃下培养24小时,测定NO₂^--N的产生量,适合于抑制亚硝酸还原酶而不抑制硝酸还原酶的DNP浓度因土而异。5种土壤中,适合产生NO₂^-的DNP浓度为5—300微克DNP/克土。6种供试土壤的硝酸还原酶活性范围为18—80微克NO₂^--N/克土·24小时。底物（KNO₃）浓度为5毫摩尔时,酶活性最高,当KNO₃浓度大于5毫摩尔时,硝酸还原酶活性受抑制。培养时间和NO₂-N产生量之间存在10小时的迟滞期,但是,总的来说,在一定的培养时间内,二者呈线性关系,但随不同土壤而异。在加入KNO₃之前,通过预培育10小时,或向水-土混合体系中充氮气3分钟以驱除其中的溶解氧,其迟滞期会缩短,但不会完全消失。当基质浓度不限制反应速度时,土壤用量与NO₂^--N产生量呈线性关系。