MCP-1真核表达载体的构建和鉴定

来源 :安徽医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yiyong6698

【摘要】

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目的构建大鼠MCP-1真核表达载体pcDNA3.1（＋）-MCP-1。方法据Genebank中大鼠MCP-1cDNA序列设计并合成特异性引物,提取糖尿病模型大鼠肾脏总RNA,利用PCR技术扩增出MCP-1全编码区基

【作者】

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齐向明张培吴永贵罗庆礼

【机构】

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安徽医科大学第一附属医院肾内科,人畜共患病安徽省重点实验室重要遗传病基因资源利用教育部省部共建重点实验室

【出处】

：

安徽医学

【发表日期】

：

2010年3期

【关键词】

：

DNA疫苗单核细胞趋化蛋白-1 构建鉴定 DNA vaccine MCP-1 Construction Identification

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目的构建大鼠MCP-1真核表达载体pcDNA3.1（＋）-MCP-1。方法据Genebank中大鼠MCP-1cDNA序列设计并合成特异性引物,提取糖尿病模型大鼠肾脏总RNA,利用PCR技术扩增出MCP-1全编码区基因片段,并将扩增产物TA克隆至pMD-18T载体,然后分别双酶切pMD-18T-MCP-1回收目的片段再克隆到真核表达载体pcDNA3.1（＋）中。结果PCR扩增得到大鼠成熟MCP-1的cDNA片段大小为500 bp,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到真核表达载体pC

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