【摘 要】
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[目的]为蟹味菇体细胞诱变、融合、基因编辑等研究提供参考.[方法]采取单因素试验和响应面法,对影响蟹味菇原生质体的制备及再生条件的主要因素——菌龄、渗透压稳定剂种类、
【机 构】
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内蒙古大学物理科学与技术学院,内蒙古呼和浩特 010021;内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古呼和浩特 010031
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[目的]为蟹味菇体细胞诱变、融合、基因编辑等研究提供参考.[方法]采取单因素试验和响应面法,对影响蟹味菇原生质体的制备及再生条件的主要因素——菌龄、渗透压稳定剂种类、溶壁酶浓度和酶解时间进行筛选与优化.[结果]单因素试验表明,原生质体最佳制备条件为菌龄7 d,渗透压稳定剂为0.6 mol/L甘露醇,溶壁酶浓度为2％,酶解5 h;最佳再生条件为菌龄6 d,渗透压稳定剂为0.6 mol/L甘露醇,溶壁酶浓度为2％,酶解3 h.响应面法表明,0.6 mol/L甘露醇为渗透压稳定剂时,最佳制备与最佳再生条件为菌龄7 d,溶壁酶浓度为2％,酶解4 h,与模型预测值有良好的拟合性.[结论]基于响应面法确定的最佳制备条件可获得较高的原生质体产量和再生率.
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