研制大鼠弥漫性轴索损伤(DAI)制模装置及评价制模效果。
方法20只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(5只)、DAI模型组(15只),采用头颅瞬间旋转装置制备大鼠DAI模型,以造模后6 h、24 h、7 d为时间点分别行神经功能缺损评分(NSS),HE染色及镀银染色观察脑组织形态学的改变,免疫组织化学染色检测DAI后脑组织β淀粉样前体蛋白(β-APP)的表达。
结果DAI后大鼠均表现出不同程度的昏迷,表现为无自主活动,刺痛反射、瞳孔对光反射迟钝,时间持续约50 min至4 h。所有大鼠清醒后活动减少,反应迟钝,不思饮食,行走不稳,各时间点NSS(6 h,9.33±0.88;24 h,5.67±0.67;7 d,4.67±0.88)均较对照组(6 h,1.33±0.67;24 h,0±0;7 d,0±0)明显增高(P<0.05)。HE染色显示DAI模型组细胞数目在皮质(6 h,323.33±95.82;24 h,294.00±54.98;7 d,277.83±52.26)、海马(7 d,214.50±43.69)、脑干(6 h,326.67±102.80;24 h,298.33±67.56;7 d,234.50±18.20)分别较对照组皮质(430.33±20.35)、海马(327.17±24.34)、脑干(429.50±81.86)明显减少(除DAI 6 h模型组脑干细胞数目P<0.05,余DAI模型亚组细胞数目P<0.01),细胞核固缩,胶质细胞增生;在皮质及脑干神经元周围可见大量空泡及少许出血点;亦可见脑干神经纤维走行紊乱。镀银染色可见脑干神经轴索串珠样轴索球形成。免疫组化染色显示DAI模型组β-APP的表达在皮质(24 h,9.16±1.32;7 d,14.50±2.83)、海马(24 h,10.14±2.56;7 d,12.50±1.95)、脑干(6 h,6.74±1.33;24 h,7.64±1.11;10.09±1.77)分别较对照组皮质(4.02±0.34)、海马(4.26±0.70)、脑干(4.38±0.85)明显增高(P<0.01),且随DAI后致伤时间的延长而增高。
结论本装置能够造成大鼠脑DAI,且具有简便、可控、确切的特点,可用于大鼠DAI模型的实验研究。