【摘 要】
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目的 探讨脱氢抗坏血酸(DHA)对高糖诱导系膜细胞产生氧自由基(ROS)的影响.方法 (1)原代培养大鼠系膜细胞;(2)以Fe3+还原法检测细胞内抗坏血酸(AA)和DHA浓度,观察系膜细胞摄取
【机 构】
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武汉大学中南医院综合医疗科,武汉大学人民医院肾内科
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目的 探讨脱氢抗坏血酸(DHA)对高糖诱导系膜细胞产生氧自由基(ROS)的影响.方法 (1)原代培养大鼠系膜细胞;(2)以Fe3+还原法检测细胞内抗坏血酸(AA)和DHA浓度,观察系膜细胞摄取AA和DHA的情况及葡萄糖、葡萄糖转运蛋白(GLUT)抑制剂细胞松弛素B对其的影响;(3)采用激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内ROS,观察高糖诱导系膜细胞ROS产生的情况及不同浓度DHA对其的影响;(4)采用凝胶电泳迁移率法(EMSA)检测活性蛋白1(AP-1)和DNA的结合活性,观察DHA对高糖诱导的系膜细胞内AP-1活性的影响.结果 (1)AA不能由细胞外进入系膜细胞,而DHA可以进入,并且随着细胞外葡萄糖浓度的增加,其进入速度减慢;细胞松弛素B则完全抑制了DHA进入到系膜细胞.(2)高糖快速诱导系膜细胞ROS产生增多;DHA抑制了高糖的这种作用,并且该抑制作用在≤4 mmol/L的浓度范围内呈浓度依赖性.(3)DHA抑制了高糖诱导的系膜细胞内AP-1的激活.结论 (1)系膜细胞是依赖DHA利用Vit C的细胞型;DHA进入该细胞依赖GLUT介导,高糖可抑制其进入细胞.(2)DHA可有效抑制高糖诱导的系膜细胞ROS产生增多,并在一定范围内呈浓度依赖性.(3)DHA在抑制ROS产生的同时,也显著抑制了高糖诱导的AP-1的激活.
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