苏云金芽孢杆菌无晶体突变株的逐级升温筛选及其转化性能

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chrisliuyaqin
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逐级从42℃到44℃和46℃升温培养、并用0.05%SDS处理苏云金芽孢杆菌YBT-1463,获得了一系列内生质粒被部分或完全消除的无晶体(Cry-)突变株,对4种Cry-突变株的转化性能及导入的外源质粒的稳定性进行了研究.用限量培养基和42℃培养筛选到Cry-突变株后,升温至44℃,从Cry-突变株得到内生质粒被进一步消除的突变株;然后升温至46℃来培养其中突变株BMBl70,并用0.05%的SDS进行处理,最终筛选到1株无质粒突变株BMBl71.用pHT3101、pBMBl736、pBTL-1和pHVl249等4种外源质粒进行的转化及稳定性研究表明,转化频率的大小及导入质粒的稳定性与用作受体菌的Cry-突变株携有的内生质粒数之间呈现一定的相关性,Cry-突变株的转化频率显著高于出发菌株,其中BMBl71的转化频率最高达107转化子/μg DNA,且所导入的外源质粒的稳定性也高于其它Cry-突变株及出发菌株YBT-1463.
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