【摘 要】
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目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默表皮生长因子受体(EGFR)对人肾癌细胞株(ACHN)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 化学合成针对EGFR的siRNA,实验分3组,通过脂质体转染法转染进ACHN肾癌细胞中,利用Western blot技术检测细胞中EGFR蛋白的敲除效率,通过锥虫蓝拒染法测定细胞生长曲线,用噻唑蓝(MTT)比色分析法、细胞划痕实验、Transwell分别检测细胞的增殖
【机 构】
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230601合肥,安徽医科大学第二附属医院泌尿外科,230601合肥,安徽医科大学第二附属医院泌尿外科,230601合肥,安徽医科大学第二附属医院泌尿外科,合肥微尺度物质科学国家实验室中国科技大学生命
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目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默表皮生长因子受体(EGFR)对人肾癌细胞株(ACHN)细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 化学合成针对EGFR的siRNA,实验分3组,通过脂质体转染法转染进ACHN肾癌细胞中,利用Western blot技术检测细胞中EGFR蛋白的敲除效率,通过锥虫蓝拒染法测定细胞生长曲线,用噻唑蓝(MTT)比色分析法、细胞划痕实验、Transwell分别检测细胞的增殖、迁移及侵袭能力.结果 特异性siRNA可明显抑制EGFR的表达；生长曲线提示,RNA干扰(RNAi)组细胞在24、48、72、96 h增殖抑制率分别为15.6％、38.4％、64.1％、68.0％,较空白对照组及阴性对照组生长明显减慢(P＜0.05)；24h后RNAi组划痕宽度为(109.97±7.50) μm,空白对照组及阴性对照组的划痕基本愈合(P＜0.05)；RNAi组穿膜细胞数[(153±13)个],分别与空白对照组[(320±20)个]、阴性对照组[(300±16)个]比较,穿膜细胞明显减少(P＜0.05).结论 siRNA抑制EGFR表达后,肾癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著降低。
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