【摘 要】
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目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)同源盒基因C13反义RNA(HOXC13-AS)对食管癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其潜在分子机制.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测食管癌组织和相应癌旁组织中lncRNA HOXC13-AS表达水平.将食管癌细胞Eca-109分为si-NC组、si-HOXC13-AS组、si-HOXC13-AS+anti-miR-NC组、si-HOXC13-AS+anti-miR-204-5p组.集落形成实验、流式细胞术分析细胞克隆形成能力、凋亡以及周期分布.免疫印迹
【机 构】
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112000 辽宁省铁岭市中心医院肿瘤内科
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目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)同源盒基因C13反义RNA(HOXC13-AS)对食管癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其潜在分子机制.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测食管癌组织和相应癌旁组织中lncRNA HOXC13-AS表达水平.将食管癌细胞Eca-109分为si-NC组、si-HOXC13-AS组、si-HOXC13-AS+anti-miR-NC组、si-HOXC13-AS+anti-miR-204-5p组.集落形成实验、流式细胞术分析细胞克隆形成能力、凋亡以及周期分布.免疫印迹法(Western blot)检测半胱氨酸蛋白酶3前体(pro-caspase3)和裂解的caspase3(Cleaved-caspase3)蛋白表达.双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证HOXC13-AS对miR-204-5p的调控作用.结果 食管癌组织中HOXC13-AS表达较癌旁组织显著升高(P<0.05).与si-NC组比较,si-HOXC13-AS组Eca-109细胞克隆形成数、S期细胞比例、pro-caspase3蛋白表达显著降低,凋亡率、G0-G1期细胞比例、Cleaved-caspase3蛋白以及miR-204-5p表达显著升高(P<0.05).与si-HOXC13-AS+anti-miR-NC组比较,si-HOXC13-AS+anti-miR-204-5p组Eca-109细胞克隆形成数、S期细胞比例、pro-caspase3蛋白表达显著升高,凋亡率、G0-G1期细胞比例、Cleaved-caspase3蛋白表达显著降低(P<0.05).miR-204-5p是HOXC13-AS的靶基因.结论 干扰lncRNA HOXC13-AS通过负调控miR-204-5p能够抑制食管癌细胞增殖,诱导细胞凋亡.
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