【摘 要】
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【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体, 在E.coli Rosetta（DE3） 菌株中高效表达并纯化融合蛋白, 研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性.【方法】以小鼠组织
【基金项目】
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广东省科技计划项目(2014A020212158)
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【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体, 在E.coli Rosetta（DE3） 菌株中高效表达并纯化融合蛋白, 研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性.【方法】以小鼠组织cDNA为模板, 设计上游和下游含有限制性酶切位点和TAT序列的引物, PCR扩增目的片段TAT-RabGEF1, 并通过双酶切构建PET28a-TAT-Rab？GEF1重组质粒载体, 在E.coli Rosetta（DE3） 大肠杆菌中诱导表达融合蛋白, 产物用亲和层析柱纯化后测量浓度及鉴定
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