MicroRNA-140在乳腺癌细胞中对Mrf2及其下游抗氧化基因的表达调控

来源 :国际免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong589
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目的 本研究旨在揭示microRNA在乳腺癌细胞中对哪表达的影响。方法利用生物信意学方法预测miR-140与Ⅳ啦的结合位点,然后采用双荧光报告系统检测miR-140对Nrf23’UTR及启动子上的8×ARE区域活性的影响;同时以实时荧光定量PCR法和Westernbloting法检测过表达miR.140和加药刺激前后细胞中Nrf2及其下游基因的mRNA和蛋白的表达变化;最后,四甲基偶氮唑蓝(MTY)法检测转染miR-140后,对于不同浓度H2O2处理的细胞,观察其生长能力及对氧化应激敏感性的变化。结果过表达miR.140能够显著抑制Nrf啦5’UTR区域的表达(P=0.007)和启动子上ARE区域的活性(P=0.01);在过表达miR-140的对照组和加药组细胞中,Ⅳ以及其下游基因mRNA和蛋白水平均被明显抑制(均P〈0.05);MTT实验结果显示转染miR-140细胞活力受到抑制,同时再使用不同浓度的H2O2刺激细胞后,细胞对氧化应激的敏感性增加(P〈0.01)。结论Ⅳ啦可能作为miR-140的一个新型靶基因,miR-140能够通过抑制Ⅳ犯,进而影响其下游一系列抗氧化基因的表达。

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